伪狂犬病病毒TKˉ/gIˉ株PK基因转移载体的构建及LacZ基因表达 |
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引用本文: | 袁子国,张秀香,刘全,高胜岩,徐慧娟,张守峰,刘晔,扈荣良.伪狂犬病病毒TKˉ/gIˉ株PK基因转移载体的构建及LacZ基因表达[J].中国兽医学报,2008,28(4):403-406. |
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作者姓名: | 袁子国 张秀香 刘全 高胜岩 徐慧娟 张守峰 刘晔 扈荣良 |
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作者单位: | [1]吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春130062 [2]军事医学科学院军事兽医研究所,吉林长春130062 [3]吉林农业大学生命技术学院,吉林长春130118 |
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基金项目: | 国家"863"计划资助项目(2007AA02Z401) |
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摘 要: | 伪狂犬病病毒TKˉ/gIˉ株基因组经AscⅠ酶切获得含PK基因的8.7kb片段,将此片段克隆入pPolyⅡ载体的AscⅠ位点,获得中间载体P8-AA,将LacZ表达盒插入其SphⅠ/NdeⅠ位点,构建重组转移载体P8AA-lacZ,将其与伪狂犬病病毒TKˉ/gIˉ株基因组共转染PK-15细胞,细胞出现病变后通过覆盖含有X-gal的营养琼脂进行蓝白斑筛选,通过蚀斑克隆方法分离到重组体PRV(rPRV),且经过连续传代的rPRV仍能稳定的表达β-半乳糖苷酶活性。通过对重组病毒PRV-LacZ和亲本株TKˉ/gIˉ株TCID50的试验表明,PK基因的缺失对病毒增殖无影响。
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关 键 词: | 伪狂犬病病毒 胸苷激酶基因 转移载体 LacZ基因 |
文章编号: | 1005-4545(2008)04-0403-04 |
修稿时间: | 2007年1月5日 |
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