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伪狂犬病病毒TKˉ/gIˉ株PK基因转移载体的构建及LacZ基因表达
引用本文:袁子国,张秀香,刘全,高胜岩,徐慧娟,张守峰,刘晔,扈荣良.伪狂犬病病毒TKˉ/gIˉ株PK基因转移载体的构建及LacZ基因表达[J].中国兽医学报,2008,28(4):403-406.
作者姓名:袁子国  张秀香  刘全  高胜岩  徐慧娟  张守峰  刘晔  扈荣良
作者单位:[1]吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春130062 [2]军事医学科学院军事兽医研究所,吉林长春130062 [3]吉林农业大学生命技术学院,吉林长春130118
基金项目:国家"863"计划资助项目(2007AA02Z401)
摘    要:伪狂犬病病毒TKˉ/gIˉ株基因组经AscⅠ酶切获得含PK基因的8.7kb片段,将此片段克隆入pPolyⅡ载体的AscⅠ位点,获得中间载体P8-AA,将LacZ表达盒插入其SphⅠ/NdeⅠ位点,构建重组转移载体P8AA-lacZ,将其与伪狂犬病病毒TKˉ/gIˉ株基因组共转染PK-15细胞,细胞出现病变后通过覆盖含有X-gal的营养琼脂进行蓝白斑筛选,通过蚀斑克隆方法分离到重组体PRV(rPRV),且经过连续传代的rPRV仍能稳定的表达β-半乳糖苷酶活性。通过对重组病毒PRV-LacZ和亲本株TKˉ/gIˉ株TCID50的试验表明,PK基因的缺失对病毒增殖无影响。

关 键 词:伪狂犬病病毒  胸苷激酶基因  转移载体  LacZ基因
文章编号:1005-4545(2008)04-0403-04
修稿时间:2007年1月5日
本文献已被 维普 等数据库收录!
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