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克氏原螯虾ISSR体系优化
引用本文:杨帆,胡小虎,刁英,邓凤娇,胡中立,舒新亚.克氏原螯虾ISSR体系优化[J].中国农学通报,2010,26(21):432-435.
作者姓名:杨帆  胡小虎  刁英  邓凤娇  胡中立  舒新亚
作者单位:1. 重庆文理学院生命科学与技术学院,重庆,402168
2. 武汉大学生命科学学院,武汉,430072
3. 湖北省水产科学研究所,武汉,430071
基金项目:国家科技支撑计划资助项目"长江中游地区特色水产品高效生产关键技术研究与示范"之课题"克氏原螯虾高效无公害生产关键技术研究与示范" 
摘    要:为了获得最佳的克氏原螯虾ISSR-PCR 反应体系,采用单因素实验法将反应体系的Taq 聚合酶、 dNTPs和Mg2+ 3 个主要因素设定5 个梯度,根据每个因素量的变化对扩增结果产生的影响进行了研究,最后确定最佳反应体系为:总体积10 μL,1 μL 10×Taq Buffer、dNTPs 浓度0.6 mmol/L、0.6 U Taq DNA polymerase、MgCl2浓度1.8 mmol/L、20 ng DNA,引物浓度0.8 μmol/L。

关 键 词:阜平大枣  阜平大枣  无芽茎段  离体培养  
收稿时间:4/7/2010 12:00:00 AM
修稿时间:2010/10/8 0:00:00

Optimization of ISSR-PCR System in Procambarus clarkii
Yang Fan,Hu Xiaohu,Diao Ying,Deng Fengjiao,Hu Zhongli,Shu Xinya.Optimization of ISSR-PCR System in Procambarus clarkii[J].Chinese Agricultural Science Bulletin,2010,26(21):432-435.
Authors:Yang Fan  Hu Xiaohu  Diao Ying  Deng Fengjiao  Hu Zhongli  Shu Xinya
Institution:1 College of Life Science and Technology,Chongqing University of Arts and Sciences,Chongqing 402168;2 College of Life Sciences,Wuhan University,Wuhan 430072;3 Hubei Fisheries Science Research Institute,Wuhan 430071)
Abstract:For optimizing ISSR-PCR reaction system of Procambarus clarkii,the single factor experiment included three factors,such as Taq DNA polymerse,dNTPs and Mg 2+,to five different concentrations were set to study the effect of these variations in ISSR-PCR amplification in this research.In conclusion the reaction system was optimized as below:1 μL 10 × Taq Buffer,0.6 mmol/L dNTPs,0.6 U Taq DNA polymerase,1.8 mmol/L MgCl 2,20 ng DNA and 0.8 μmol/L primer in 10 μL reaction solution.
Keywords:ISSR
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