珍稀濒危植物宝华玉兰ISSR-PCR反应体系建立及优化 |
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引用本文: | 陈云霞,葛乐乐,王雪薇.珍稀濒危植物宝华玉兰ISSR-PCR反应体系建立及优化[J].湖北农业科学,2016(16):4206-4209. |
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作者姓名: | 陈云霞 葛乐乐 王雪薇 |
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作者单位: | 南京森林警察学院,南京,210023 |
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基金项目: | 中央高校基本科研业务费专项资金项目(LGZD201505) |
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摘 要: | 为建立和优化宝华玉兰(Magnolia zenii Cheng)ISSR-PCR反应体系,采用正交试验和单因子试验方法对影响PCR扩增体系中的Mg~(2+)、d NTPs、DNA模板、引物和Taq聚合酶一定浓度的用量5个因子进行分析比较。结果显示,宝华玉兰ISSR-PCR 25μL反应体系中的5个因子最佳水平分别为DNA模板(20 ng/μL)3.5μL,引物(10μmol/L)1.25μL,Taq聚合酶(5 U/μL)0.2μL,Mg~(2+)(25 mmol/L)2.0μL,d NTPs(2.5 mmol/L)0.8μL。宝华玉兰ISSR-PCR反应的最优体系建立,为进一步利用ISSR对其进行分子标记辅助育种、分子身份证构建和遗传多样性分析等后续研究奠定了基础。
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关 键 词: | 宝华玉兰(Magnolia zenii Cheng) ISSR-PCR反应体系 种质资源保护 |
Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Rare and Endangered Plant Magnolia zenii |
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Abstract: | |
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Keywords: | Magnolia zenii Cheng ISSR-PCR reaction system germplasm resources protection |
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