鸡刺鼠相关蛋白多肽抗体的制备与鉴定

制备鸡刺鼠相关蛋白(agouti-related protein,AgRP)多肽抗体并鉴定。根据GenBank中报道的AgRP一级结构信息,用TMHMM 2.0和DNA Star软件分析其蛋白跨膜结构域、二级结构、疏水性、亲水性等,设计出1段13个氨基酸的多肽。将合成后的多肽与牛血清白蛋白(BSA)偶联,用与BSA偶联的AgRP多肽免疫新西兰大白兔,获取血清后亲和纯化出抗AgRP多肽抗体。通过ELISA法检测效价,Western blot和免疫组化法检测抗体特异性。结果获得了高效价的鸡AgRP多肽抗体,ELISA法测定其效价可达到1∶128 000,并可用于免疫组化研究。