| 单核细胞增生李斯特菌 sRNA 伴侣分子 hfq的基因克隆、表达及纯化 |
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| 引用本文： | 彭叶龙,乔军,孟庆玲,谢堃,陈诚,刘田莉,马玉,才学鹏,陈创夫.单核细胞增生李斯特菌 sRNA 伴侣分子 hfq的基因克隆、表达及纯化[J].华北农学报,2014(5). |
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| 作者姓名： | 彭叶龙 乔军 孟庆玲 谢堃 陈诚 刘田莉 马玉 才学鹏 陈创夫 |
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| 作者单位： | 1. 石河子大学 动物科技学院，动物疾病防控兵团重点实验室，新疆 石河子 832003
2. 中国农业科学院 兰州兽医研究所,甘肃 兰州,730046 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31360596；30960274)；国家国际科技合作专项 |
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| 摘 要： | 为克隆、表达单核细胞增生李斯特菌sRNA分子伴侣蛋白hfq基因，并纯化重组蛋白，通过PCR的方法从单核细胞增生李斯特菌基因组DNA中扩增出hfq基因，将扩增产物克隆于pMD18-T载体中，测序验证后，再将hfq基因亚克隆至表达载体pET-32a（＋）中，成功构建pET-32a（＋）-hfq原核表达载体。然后，转化至大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞中，通过IPTG进行诱导表达，对表达蛋白进行可溶性分析，并采用Ni-NTA纯化目的蛋白。结果显示：克隆的hfq基因全长234 bp，编码77个氨基酸，通过SDS-PAGE可以检测到27 kDa的蛋白特异性条带；并从上清中纯化得到了Hfq融合蛋白。为进一步研究该蛋白的生物学功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 单核细胞增生李斯特菌 hfq基因 sRNA伴侣分子 克隆 表达 纯化 |
Gene Cloning,Expression and Purification of sRNA Chaperone hfq of Listeria monocytogenes |
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| PENG Ye-long,QIAO Jun,MENG Qing-ling,XIE Kun,CHEN Cheng,LIU Tian-li,MA Yu,CAI Xue-peng,CHEN Chuang-fu.Gene Cloning,Expression and Purification of sRNA Chaperone hfq of Listeria monocytogenes[J].Acta Agriculturae Boreali-Sinica,2014(5). |
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| Authors: | PENG Ye-long QIAO Jun MENG Qing-ling XIE Kun CHEN Cheng LIU Tian-li MA Yu CAI Xue-peng CHEN Chuang-fu |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Listeria monocytogenes hfq gene sRNA chaperone Cloning Expression Purification |
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