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大弹涂鱼TLR基因分子进化研究及其在鳗弧菌胁迫后的表达分析
引用本文:周建波,孟繁星,黎明,王日昕,石戈.大弹涂鱼TLR基因分子进化研究及其在鳗弧菌胁迫后的表达分析[J].中国水产科学,2019,26(6):1049-1063.
作者姓名:周建波  孟繁星  黎明  王日昕  石戈
作者单位:1. 浙江海洋大学海洋科学与技术学院, 浙江 舟山 316022;2. 宁波大学海洋学院, 浙江 宁波 315211
基金项目:国家自然科学基金资助项目(31472279).
摘    要:大弹涂鱼(Boleophthalmus pectinirostris)是一种生活在潮间带的淤泥滩和红树林等两栖环境中的鱼类,其免疫系统面临比水生生活更大的选择压力。Toll样受体基因(简称TLR)是重要的先天免疫成员,一直是鱼类分子免疫学的研究热点之一。为了探究大弹涂鱼TLR基因是否因为其独特的生活环境而产生适应性进化以及其TLR基因在受到细菌攻击后的免疫应答模式,本研究从大弹涂鱼皮肤转录组中获得了TLR5, TLR8和TLR9完整序列以及TLR3和TLR7部分序列,采用分子生物信息学对大弹涂鱼TLR5, TLR8和TLR9基因序列以及氨基酸序列进行了分析,并根据所构建的系统发育树对5个TLR基因进行了分子进化分析,采用荧光定量PCR方法对大弹涂鱼5个TLR基因的组织表达分布和鳗弧菌攻击后5个TLR基因的免疫应答模式开展了研究。结果显示, TLR5基因全长3071 bp,包括长度为2646 bp的编码区,共编码882个氨基酸;TLR8基因全长3175 bp,包括长度为3033 bp的编码区,共编码1011个氨基酸;TLR9基因全长3398 bp,编码区长度为3093 bp,共编码1031个氨基酸。大弹涂鱼3个TLR基因与其他物种的TLR基因结构相似,具有高度保守性。位点模型结果表明,鱼类TLR3, TLR5和TLR8是高度保守的,而TLR7和TLR9在长期进化过程中产生了适应性进化;而进化枝-位点模型结果表明,为了适应更加复杂多变的两栖环境,大弹涂鱼TLR9基因可能产生了适应性进化。大弹涂鱼5个TLR基因在8个健康组织(肠,眼,肾,肝,脑,肌肉,脾和皮肤)中均有表达,在肝脏和脾脏中的表达量较高。在受到鳗弧菌(Vibrio anguillarum)攻击后的免疫表达模式表明了大弹涂鱼5个TLR基因在应对细菌入侵时起到了重要作用。

关 键 词:大弹涂鱼  Toll样受体基因  序列分析  分子进化分析  鳗弧菌  基因表达
修稿时间:2019/11/6 0:00:00

Molecular evolution analysis of 5 TLR genes in the great blue-spotted mudskipper (Boleophthalmus pectinirostris) and the immune response patterns after Vibrio anguillarum infection
ZHOU Jianbo,MENG Fanxing,LI Ming,WANG Rixin,SHI Ge.Molecular evolution analysis of 5 TLR genes in the great blue-spotted mudskipper (Boleophthalmus pectinirostris) and the immune response patterns after Vibrio anguillarum infection[J].Journal of Fishery Sciences of China,2019,26(6):1049-1063.
Authors:ZHOU Jianbo  MENG Fanxing  LI Ming  WANG Rixin  SHI Ge
Institution:1. Marine Science and Technology College, Zhejiang Ocean University, Zhoushan 316000, China;2. School of Marine Sciences, Ningbo University, Ningbo 315211, China
Abstract:
Keywords:Boleophthalmus pectinirostris  toll-like receptors  sequence analysis  molecular evolution  Vibrio anguillarum  gene expression
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