| 哈维氏弧菌RT-LAMP检测方法建立与应用 |
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| 作者姓名： | 涂志刚 杨海朋 崔婧 严耿杰 李丹萍 周永灿 邱名毅 |
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| 作者单位： | 1. 海南省海洋与渔业科学院, 海南 海口 571126;2. 海南大学海洋学院, 海南 海口 570228;3. 广州迪澳科技有限公司, 广东 广州 510663 |
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| 基金项目： | 2016年海南省重大科技计划项目（ZDKJ2016011）;现代农业产业技术体系专项（CARS-47）;2016年海南省科研院所技术开发专项"海南深水网箱养殖鱼类细菌性病害诊断、病原分析及其综合防治研究";2017年海洋与渔业技术应用推广"水产养殖病害测报与预报". |
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| 摘 要： | 哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)是引起海南省后水湾深水网箱养殖卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)"烂身病"的主要病原菌。为了能够快速诊断该病原菌,急需建立一种耗时短、准确以及便捷的检测方法。本研究利用分离到的致病菌株QT520的ToxR基因序列设计特异性引物和加入SYTO-9特异荧光染料,建立了一种可以实时、快速检测哈维氏弧菌的LAMP法(RT-LAMP)。该方法对哈维氏弧菌的基因组DNA及菌液灵敏度分别为100 fg/μL和10~3 cfu/mL,与Real-time PCR法检测灵敏度相当,比普通PCR的检测灵敏度要分别高1000倍和10倍,能有效区分哈维氏弧菌与坎氏弧菌(Vibrio campbellii);可以实时观察检测结果,且检测时间只需要40 min;具有耗时短、特异性和灵敏度高、仪器便携、操作简单且能实时观察检测结果等优点,非常适合在生产现场进行哈维氏弧菌的检测。
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| 关 键 词： | RT-LAMP 哈维氏弧菌 卵形鲳鲹 烂身病 快速检测 |
| 修稿时间： | 2018-12-06 |
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