| 谷氨酰胺对斜带石斑鱼GF-1细胞中C-Myc蛋白的表达与神经坏死病毒复制的影响 |
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| 作者姓名： | 沈海洋 卢志杰 秦真东 赵丽娟 李亚男 刘春 杨光 叶成凯 潘淦 林蠡 |
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| 作者单位： | 华南师范大学生命科学学院,广东省水产健康安全养殖重点实验室,广东 广州 510631;仲恺农业工程学院动物科技学院,广东省水环境与水产品安全工程技术研究中心,广州市水产病害与水禽养殖重点实验室,广东 广州 510225;仲恺农业工程学院动物科技学院,广东省水环境与水产品安全工程技术研究中心,广州市水产病害与水禽养殖重点实验室,广东 广州 510225;华南师范大学生命科学学院,广东省水产健康安全养殖重点实验室,广东 广州 510631 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31872606);广东省海洋与渔业局基金(GDME-2018C006,D21822202);中国—东盟海上合作基金(CAMC-2018F);广东省现代农业产业技术体系创新团队建设专项(2019KJ141) |
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| 摘 要： | 为探讨C-Myc表达、谷氨酰胺代谢和神经坏死病毒复制三者之间的关系,本研究首先克隆了斜带石斑鱼鳍条细胞(GF-1)中的C-Myc基因(GF-1-C-Myc),结果显示GF-1-CMyc基因cDNA全长814 bp,开放阅读框(ORF)为285 bp,编码95个氨基酸(aa),有亮氨酸拉链结构域与螺旋-环-螺旋(HLH)结构域。实验表达和纯化了GF-1-C-Myc蛋白,并制备其多克隆抗体。采用实时定量PCR技术(qRT-PCR)与免疫印迹法(WB)检测了GF-1-C-Myc基因的表达和神经坏死病毒的复制。结果显示,缺乏谷氨酰胺会同时抑制GF-1-C-Myc基因的表达和神经坏死病毒(NNV)的复制,添加谷氨酰胺可同时促进GF-1-C-Myc的表达和NNV的复制;此外,NNV感染可上调GF-1-C-Myc基因的表达,并显著消耗GF-1细胞培养液中的谷氨酰胺。研究表明,GF-1-C-Myc基因可调控宿主谷氨酰胺代谢,从而有利于神经坏死病毒的复制。本结果为防控NNV的感染提供了参考。
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| 关 键 词： | 斜带石斑鱼 C-Myc基因 GF-1细胞 神经坏死病毒 感染 谷氨酰胺 |
| 收稿时间： | 2019-09-17 |
| 修稿时间： | 2019-10-25 |
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