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木瓜凝乳蛋白酶基因的克隆及在原核细胞中的表达
引用本文:蔡勤安,于志晶,尚丽霞,许诺,曾军,马瑞,刘艳芝. 木瓜凝乳蛋白酶基因的克隆及在原核细胞中的表达[J]. 吉林农业科学, 2015, 0(3): 23-25,79
作者姓名:蔡勤安  于志晶  尚丽霞  许诺  曾军  马瑞  刘艳芝
作者单位:吉林省农业科学院农业生物技术研究所;吉林大学生命科学学院
摘    要:
以青番木瓜总RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增出木瓜凝乳蛋白酶基因CHY(chymopapain),构建带有His-tag的原核表达载体p EASY-E1-CHY。将该重组载体转化到大肠杆菌BL21(DE3)菌株中,重组菌株用IPTG诱导表达,在诱导6 h,IPTG浓度为0.05 mmol/L时重组蛋白表达量最高。SDS-PAGE凝胶电泳和West-ern-Blot杂交分析结果表明蛋白大小为45 k Da。用脱脂奶粉进行凝乳分析,证明此木瓜凝乳蛋白酶具有凝乳活性,此结果为今后利用生物技术进行木瓜凝乳蛋白酶工程化生产奠定了基础。

关 键 词:木瓜凝乳蛋白酶  基因克隆  原核表达  活性检测

Cloning of Chymopapain Gene and Its Expression in E.coli
CAI Qin-an;YU Zhi-jing;SHANG Li-xia;XU Nuo;ZENG Jun;MA Rui;LIU Yan-zhi. Cloning of Chymopapain Gene and Its Expression in E.coli[J]. Journal of Jilin Agricultural Sciences, 2015, 0(3): 23-25,79
Authors:CAI Qin-an  YU Zhi-jing  SHANG Li-xia  XU Nuo  ZENG Jun  MA Rui  LIU Yan-zhi
Affiliation:CAI Qin-an;YU Zhi-jing;SHANG Li-xia;XU Nuo;ZENG Jun;MA Rui;LIU Yan-zhi;Agro-Biotechnology Research Institute, Jilin Academy of Agricultural Sciences;College of Life Science, Jilin University;
Abstract:
Keywords:
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