一株牛病毒性腹泻/黏膜病强毒株的分离与鉴定

从云南某牛场疑似BVDV感染的病料通过接种MDBK细胞分离到1株BVDV，将其命名为BVDV/W。该分离毒株连传15代均不产生CPE，为NCP型BVDV。通过电镜检测可观察到直径为 40～60nm病毒粒子。该分离病毒能被牛病毒性腹泻标准阳性血清中和，且能被BVDV IFA荧光抗体识别；针对常用作BVDV基因分型的5′-UTR设计特异性引物，经RT-PCR可扩增出288bp特异性片段。将所测的目的片段序列与中参考序列进行同源性比较，结果显示与293株和Y2株同源关系较近，分别为90.0%和89.9%，与2014年以来我国报道的分离株同源性在88%左右，具有一定的代表性。5′-UTR遗传进化分析证实该分离毒株为BVDV-1型。动物回归试验显示，该分离毒株可引起出现体温升高、腹泻、粘膜病等典型的BVD/MD症状，表明该毒株为1株BVD强毒株。

Isolation and identification of one high virulence Bovine Viral Diarrhea Virus/Mucosal Disease Virus (BVDV/MDV) strain