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猪瘟病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立和初步应用
作者姓名:李军  潘艳  禤雄标  胡帅  马春霞  谢宇舟  陈泽祥  许力干  谢永平  杨威
作者单位:(广西兽医研究所,广西南宁 530001)
摘    要:根据GenBank公布的猪瘟病毒基因组5′非编码区基因序列进行同源性比较分析,选择保守序列区作为扩增区域,设计1对特异性扩增引物,通过优化反应条件,建立了一个用于猪瘟病毒快速定量检测的SYBR Green Ⅰ 荧光定量RT-PCR方法。试验结果表明该方法重复性好,反应批内循环阈值差异不显著。与猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒和猪圆环病毒2型等猪源病毒无交叉反应,具有高度的特异性,而且灵敏度高,最小检出量为2×102病毒基因组拷贝数。利用此方法对15例临床样本进行检测,其结果与兔体交叉免疫试验一致,表明此方法可作为猪瘟实验室快速诊断和疫情监测的一种快速、准确、简便的检测工具。

关 键 词:猪瘟病毒  实时荧光定量RT-PCR   
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