萝卜游离小孢子培养及胚再生植株研究

[目的]探讨在自然生长条件下若干因素对萝卜（RaphanussativusL．）小孢子胚诱导及胚再生植株的影响。[方法]首先探讨不同萝卜品种的出胚能力，然后分析热激、低温预处理和培养基对小孢子培养的影响，最后研究胚状体再生成苗与植株继代培养情况。[结果]对22份萝卜材料进行游离小孢子培养，12份获得胚状体，3份获得再生植株，出胚材料中90％以上为杂种一代。4℃低温预处理0～3d小孢子出胚率无明显差异；培养基中加入1～2滴0．5％活性炭和一定浓度6-BA可显著促进小孢子诱导产生胚；不同萝卜品种适宜的热激温度和时间有所不同；发育正常的子叶型胚成苗率为100％；胚萌发分化早期适宜培养基为B5＋2％蔗糖＋1．2％琼脂，后期可逐渐将琼脂浓度降低；FCM测定小孢子植株自然加倍率为30％，单倍体占少数，四倍体与嵌合体（二、四倍）均为30％；秋水仙素处理单倍体植株，人工加倍率达60％。[结论]该研究完善了萝卜游离小孢子培养技术，可提高单倍体获得频率，加快这一技术在育种实践中的应用步伐。