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| 豌豆清蛋白１（PA１）基因的克隆及对苜蓿的转化 | |
| 引用本文： | 张改娜,贾敬芬. 豌豆清蛋白１（PA１）基因的克隆及对苜蓿的转化[J]. 草业学报, 2009, 18(3): 117-125. DOI: 10.11686/cyxb20090316 |
| 作者姓名： | 张改娜 贾敬芬 |
| 作者单位： | 1. 河南科技大学农学院,河南,洛阳,471000;西北大学生命科学学院,陕西,西安,710069 2. 西北大学生命科学学院,陕西,西安,710069 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目 |
| 摘 要： | 本研究用ＰＣＲ 方法从豌豆（食荚大菜豌）克隆出富含硫氨基酸、同时具有抗虫作用的双功能的蛋白质基因－豌豆清蛋白１（ＰＡ１）基因，并构建了植物表达载体ｐＣＡＭＢＩＡｌ３０１－ＰＡ１。采用农杆菌介导法转化了紫花苜蓿，并对其转化体系进行了优化，得到了多个转基因胚性愈伤组织及其再生植株。ＰＣＲ 和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测表明，ＰＡ１基因和潮霉素抗性基因已被整合到了宿主细胞。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ 分析表明该基因在再生植株中有一定表达。游离氨基酸分析表明，ＰＡ１基因的表达转基因苜蓿中蛋氨酸和半胱氨酸的含量从０．１％提高到０．４％。 |
| 关 键 词： | 豌豆清蛋白（ＰＡ１）基因 富硫氨基酸 苜蓿 遗传转化 |
| 收稿时间： | 1900-01-01; |
Cloning of PA1 gene from Pisum sativum and genetic transformation on Medicago sativa |
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| ZHANG Gai-na,JIA Jing-fen. Cloning of PA1 gene from Pisum sativum and genetic transformation on Medicago sativa[J]. Acta Prataculturae Sinica, 2009, 18(3): 117-125. DOI: 10.11686/cyxb20090316 | |
| Authors: | ZHANG Gai-na JIA Jing-fen |
| Affiliation: | ZHANG Gai-na1,2,JIA Jing-fen2(1.College of Agriculture of Henan University of Science , Technology,Luoyang 471000,China,2.School of Life Science,Northwest University,Xi'an 710069,China) |
| Abstract: | A gene,a sulphur-rich and insect-toxic seed albumin-PA1 gene,was cloned by PCR method from Pisum sativum(cultivar shijiadacaiwan).In order to characterize the function of this gene,a plant expression vector,pCAMBIA1301-PA1,was constructed.This vector was transformed into M.sativa via Agrobacterium-mediated method.The conditions for transformation were optimized.The several transgenic embryogenic calli and regenerated plantlets were obtained.PCR and Southern blotting identification confirmed that PA1 gene an... |
| Keywords: | PA1 gene sulphur-rich amino acid Medicago sativa genetic transformation |
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