| 表达鸭坦布苏病毒衣壳蛋白的重组腺病毒载体构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 吴庆国,李莎莎,王安平,卢会鹏,成玉婷.表达鸭坦布苏病毒衣壳蛋白的重组腺病毒载体构建与鉴定[J].中国家禽,2024(3):51-57. |
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| 作者姓名： | 吴庆国 李莎莎 王安平 卢会鹏 成玉婷 |
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| 作者单位： | 江苏农牧科技职业学院,江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室,江苏现代畜牧与新兽药工程技术中心 |
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| 基金项目： | 江苏省高等学校自然科学研究面上项目（22KJB230005）； |
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| 摘 要： | 为构建鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)衣壳蛋白的复制缺陷型人5型腺病毒(Ad5)为载体的重组腺病毒，研究通过一步克隆技术将DTMUV Capsid基因插入到含有结核分枝杆菌的热休克蛋白70(mHsp70)为佐剂的pShuttle-CMV-Hsp70质粒中，构建能够表达DTMUV Capsid和mHsp70蛋白的重组穿梭质粒pShuttle-DTMUV Capsid，并与含有pAdEasy-1腺病毒骨架载体的大肠杆菌BJ5183感受态细胞进行同源重组，获得重组腺病毒质粒pAd-DTMUV Capsid。载体质粒经Pac I酶切线性化后转染至HEK 293A细胞，包装重组腺病毒rAdv-DTMUV Capsid。结果显示，rAdv-DTMUV Capsid在病毒传代过程中目的基因稳定存在，且病毒滴度可达2.3×108 PFU/mL。Western blot等结果表明rAdv-DTMUV Capsid在HEK 293A细胞中表达了DTMUV特异性蛋白Capsid。DEF细胞感染试验证明rAdv-DTMUV Capsid可感染鸭源细胞，且诱...
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| 关 键 词： | 鸭坦布苏病毒 衣壳蛋白 重组腺病毒 Hsp70 |
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