| 抗猪流行性腹泻病毒单克隆抗体的研制及其特性鉴定 |
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| 引用本文： | 孙智锋,方锡玲.抗猪流行性腹泻病毒单克隆抗体的研制及其特性鉴定[J].中国兽医学报,1998,18(2):131-134. |
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| 作者姓名： | 孙智锋 方锡玲 |
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| 作者单位： | 上海市农业科学院畜牧兽医研究所 |
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| 基金项目： | 上海市科技兴农重点攻关项目 |
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| 摘 要： | 以新生乳猪增殖猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ），通过蔗糖密度梯度离心将其纯化，获得较为完整的病毒颗粒。病毒ＥＬＩＳＡ效价为１∶３×１０５，蛋白含量为３．９６ｇ／Ｌ。将提纯的ＰＥＤＶ免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取免疫鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞进行融合，融合率为９５．６％。用间接ＥＬＩＳＡ进行筛选，共检出３８个阳性孔，阳性率为２８．８％。对其中１５个阳性值较高的孔进行３次再克隆，阳性率达１００％，最后获得１５株稳定分泌特异性抗ＰＥＤＶ单抗（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞。ＥＬＩＳＡ阻断试验与交叉试验证明，其分泌的抗体具有高度特异性。腹水和细胞培养上清的ＥＬＩＳＡ效价分别为１∶１０３～１∶１０６和１∶１２８～１∶５１２。经鉴定，１５株ＭｃＡｂ的分子类型均为ＩｇＧ，均无免疫沉淀特性。杂交瘤细胞的染色体数目为９０～１１０，平均９５。尤为重要的是，这些杂交瘤细胞所分泌的抗体，有的对ＰＥＤＶ具有中和作用，能够阻断病毒对猪只的侵害作用。
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| 关 键 词： | 猪流行性腹泻病毒 单克隆抗体 ELISA |
Development and Characterization of Monoclonal Antibodies against Porcine Epidemic Diarrhea Virus |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) monoclonal antibody (McAb) enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) |
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