| 表达IBDV VP2蛋白重组减毒沙门菌活载体疫苗株的构建及免疫原性分析 |
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| 引用本文： | 许信刚,赵红妮,陈光达,张宽,童德文.表达IBDV VP2蛋白重组减毒沙门菌活载体疫苗株的构建及免疫原性分析[J].中国兽医学报,2011,31(12). |
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| 作者姓名： | 许信刚 赵红妮 陈光达 张宽 童德文 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌,712100 |
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| 基金项目： | 西北农林科技大学青年学术骨干项目(E111020901); 陕西省农业科技创新项目(2010NKC-06); 教育部新世纪优秀人才支持计划(NCET-07-0701) |
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| 摘 要： | 通过PCR克隆出IBDV VP2基因,将其插入到表达载体pYA3341中,构建重组质粒pYA3341-VP2。将重组质粒电转入鼠伤寒沙门菌疫苗株X4550（缺失Asd、Cya、Crp基因）,获得重组疫苗菌株X4550（pYA3341-VP2）。进行重组菌VP2蛋白表达的鉴定;测定重组菌的稳定性、生长曲线、安全性以及小鼠免疫试验。结果表明,酶切鉴定证实重组质粒构建成功;SDS-PAGE和Western blot证实重组菌表达的VP2蛋白能与鸡抗IBDV阳性血清特异性结合;重组菌株在体外营养选择压力下,可稳定地携带重组质粒传代繁殖,在体内可稳定地定居于肠系膜淋巴结和脾脏;小鼠口服试验证实重组菌无毒性作用;口服重组菌免疫小鼠,ELISA检测产生了抗IBDV抗体;中和试验表明产生的抗体具有中和活性。本试验成功构建了能稳定表达IBDV VP2蛋白的口服减毒鼠伤寒沙门菌疫苗株X4550（pYA3341-VP2）,为研究IBD口服基因工程疫苗奠定了基础。
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| 关 键 词： | 传染性法氏囊病病毒 VP2蛋白 减毒鼠伤寒沙门菌 |
Construction of the recombinant attenuated Salmonella typhimurium live vector vaccine strain expressing IBDV VP2 protein and its immunogenicity analysis |
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| XU Xin-Gang,ZHAO Hong-ni,CHEN Guang-da,ZHANG Kuan,TONG De-wen.Construction of the recombinant attenuated Salmonella typhimurium live vector vaccine strain expressing IBDV VP2 protein and its immunogenicity analysis[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2011,31(12). |
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| Authors: | XU Xin-Gang ZHAO Hong-ni CHEN Guang-da ZHANG Kuan TONG De-wen |
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| Institution: | XU Xin-Gang,ZHAO Hong-ni,CHEN Guang-da,ZHANG Kuan,TONG De-wen(College of Veterinary Medicine,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China) |
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| Abstract: | To construct a recombinant attenuated Salmonella typhimurium oral live vector strain expressing the antigen of IBDV VP2,the IBDV VP2 gene was cloned and inserted into expression vector pYA3341.The recombinant plasmid pYA3341-VP2 was electro-transformed into delta cya,delta crp,delta asd attenuated S.typhimurium vaccine strains X4550 to construct the live vaccine strains X4550(pYA3341-VP2).The recombinant strain of X4500(pYA3341-VP2) was identified its VP2 protein expression,stability,growth curve,safety in ... |
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| Keywords: | IBDV VP2 protein attenuated S typhimurium |
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