水稻基腐病菌拮抗菌解淀粉芽孢杆菌E3菌株的鉴定及抑菌活性

目的 纯化和鉴定从柑橘根际土壤分离得到的可抑制水稻基腐病菌Dickeya zeae EC1生长的解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens，并解析其抑菌机制。方法 采用平板扩散法从根际土壤中筛选出1株拮抗D. zeae EC1的B. amyloliquefaciens E3菌株；根据细菌菌落表型、生理生化特征结合16S rDNA序列分析等方法对E3菌株进行分类鉴定；检测无菌E3培养液对D. zeae EC1侵染水稻种子能力的影响；盐酸沉淀结合丙酮抽提法提取E3菌株脂肽粗提物；采用平板对峙法测定E3菌株脂肽粗提物对病原真菌的抑菌活性，琼脂扩散法测定E3菌株脂肽粗提物对病原细菌的抑菌活性及最小抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration, MIC)；用Durashell C18柱对脂肽粗提物进行HPLC分离纯化；通过液相色谱−质谱联用(LC-ESI-MS)分析，鉴定抑菌物质的相对分子质量并推测其化学组成。结果 B. amyloliquefaciens E3菌株对茄病镰刀菌Fusarium solani、香蕉基腐病菌、茄科劳尔氏菌Ralstonia solanacearum等多种植物病原菌生长具有抑制作用，表现为广谱抗性；B. amyloliquefaciens E3菌株的无菌培养液能够抑制D. zeae EC1侵染萌发的水稻种子，显著提高水稻种子的萌芽率；B. amyloliquefaciens E3菌株的脂肽粗提物可以抑制D. zeae EC1的生长，其MIC为348.97 μg/mL；HPLC分离纯化结合LC-ESI-MS分析发现，B. amyloliquefaciens E3菌株分泌的主要抑菌活性物质包括Surfactin、Fengycin和Iturin 3类脂肽类抗生素。结论 B. amyloliquefaciens E3菌株具有作为生防菌的潜力，它可能通过分泌Surfactin、Fengycin和Iturin 3种脂肽类抑菌活性物质，拮抗水稻基腐病菌、茄科劳尔氏菌、茄病镰刀菌等多种植物病原菌。研究结果可为该菌的生物防治应用提供理论依据。

Identification of an antagonistic strain Bacillus amyloliquefaciens E3 against Dickeya zeae and its antimicrobial activity