| SYBR Green Ⅰ定量RT-PCR快速检测H5亚型禽流感病毒方法的建立 |
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| 引用本文： | 马莉,汤承,李明义,岳华,张彬,张兆敏.SYBR Green Ⅰ定量RT-PCR快速检测H5亚型禽流感病毒方法的建立[J].中国家禽,2008,30(20). |
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| 作者姓名： | 马莉 汤承 李明义 岳华 张彬 张兆敏 |
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| 作者单位： | 1. 西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都,610041;中国医学科学院成都输血研究所,四川成都,610041
2. 西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都,610041
3. 中国动物卫生与流行病学中心,山东青岛,266032 |
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| 摘 要： | 针对H5亚型禽流感H基因保守序列设计引物,建立基于SYBR Green Ⅰ检测模式的荧光定量RT-PCR(real-time ILT-PCR,RtLT-PCR),最低检测限为2.1x102拷贝质粒DNA,扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,Tm=(79.5±0.3)℃,对H5N1亚型和H5N2亚型禽流感病毒灭活抗原均有阳性扩增,对H7、H9亚型禽流感病毒、健康鸡、鸭组织及其它家禽常见病原11NAJL扩增,可重复性好,批内变异系数及批间变异系数分别为2.99%和5.12%;检测速度快,从样本处理到报告结果仅需5 h.
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| 关 键 词： | H5亚型禽流感病毒 SYBR Green Ⅰ 荧光定量反转录聚合酶链式反应 |
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