| 棉铃虫脂肪酸结合蛋白的克隆与表达 |
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| 引用本文： | 任苏伟,赵洁,刘宁,尼加提&#;迪里木拉提,刘小宁.棉铃虫脂肪酸结合蛋白的克隆与表达[J].植物保护学报,2019,46(3):522-529. |
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| 作者姓名： | 任苏伟 赵洁 刘宁 尼加提&#;迪里木拉提 刘小宁 |
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| 作者单位： | 新疆大学生命科学与技术学院, 新疆生物资源基因工程重点实验室, 乌鲁木齐 830046,新疆大学生命科学与技术学院, 新疆生物资源基因工程重点实验室, 乌鲁木齐 830046,新疆农业科学院农作物品种资源研究院, 乌鲁木齐 830091,新疆大学生命科学与技术学院, 新疆生物资源基因工程重点实验室, 乌鲁木齐 830046,新疆大学生命科学与技术学院, 新疆生物资源基因工程重点实验室, 乌鲁木齐 830046 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（31471781），新疆维吾尔自治区自然科学基金（2016D01C042） |
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| 摘 要： | 为深入了解棉铃虫Helicoverpa armigera脂肪酸结合蛋白HaFABP1在参与细胞内脂肪酸代谢过程中的功能,基于酵母单杂交结果从幼虫中肠cDNA中扩增得到HaFABP1的开发阅读框,构建重组菌株BL21-pET28a-HaFABP1,进行融合蛋白His-HaFABP1的诱导和纯化,并利用实时荧光定量PCR检测棉铃虫不同时期和组织中HaFABP1的表达规律,最后检测2-十三烷酮处理下棉铃虫6龄幼虫中肠组织内HaFABP1的变化情况。结果显示,克隆获得的棉铃虫HaFABP1为405 bp,编码134个氨基酸,相对分子量和等电点分别为15.08 kD和5.54;在37℃下用0.5 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组菌株4 h后,得到约18.4 kD的可溶性蛋白His-HaFABP1,纯化后的融合蛋白条带单一且大小符合预期;HaFABP1在棉铃虫的脂肪体、中肠、体壁和头部中都有表达,在头部的表达量最低,在中肠中的表达量最高;HaFABP1在棉铃虫幼虫的每个发育时期都有表达,表达量总体呈现先降低后升高的趋势,4龄时最低而1龄时最高;10 mg/g 2-十三烷酮处理饲料饲喂棉铃虫6龄幼虫6 h和15 h后,中肠内HaFABP1的表达量与对照相比显著提高,且随着时间的延长逐渐增加。表明HaFABP1与棉铃虫的生长发育有关,并且有可能参与了昆虫的解毒过程。
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| 关 键 词： | 棉铃虫 脂肪酸结合蛋白 原核表达 时空表达 2-十三烷酮 |
| 收稿时间： | 2018/3/16 0:00:00 |
Cloning and expression of fatty acid-binding protein from cotton bollworm Helicoverpa armigera |
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| Ren Suwei,Zhao Jie,Liu Ning,Nijiati&#;Dilimulati and Liu Xiaoning.Cloning and expression of fatty acid-binding protein from cotton bollworm Helicoverpa armigera[J].Acta Phytophylacica Sinica,2019,46(3):522-529. |
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| Authors: | Ren Suwei Zhao Jie Liu Ning Nijiati&#;Dilimulati and Liu Xiaoning |
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| Institution: | Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Gene Engineering, College of Life Science and Technology, Xinjiang University, Urumqi 830046, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China,Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Gene Engineering, College of Life Science and Technology, Xinjiang University, Urumqi 830046, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China,Institute of Crop Variety Resources, Xinjiang Academy of Agricultural Sciences, Urumqi 830091, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China,Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Gene Engineering, College of Life Science and Technology, Xinjiang University, Urumqi 830046, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China and Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Gene Engineering, College of Life Science and Technology, Xinjiang University, Urumqi 830046, Xinjiang Uygur Autonomous Region, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Helicoverpa armigera fatty-acid binding protein (FABP) prokaryotic expression spatiotemporal expression 2-tridecanone-treated |
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