| 鸡恒定链分子跨膜区2个氨基酸残基在形成MHCⅡ-Ii复合物中的作用 |
| |
| 引用本文： | 许发芝,吴胜国,刘雪兰,余为一.鸡恒定链分子跨膜区2个氨基酸残基在形成MHCⅡ-Ii复合物中的作用[J].畜牧兽医学报,2011,42(5). |
| |
| 作者姓名： | 许发芝 吴胜国 刘雪兰 余为一 |
| |
| 作者单位： | 1. 安徽农业大学安徽省人兽共患病学重点实验室,合肥,230036
2. 安徽安丰堂动物药业有限公司,合肥,230036 |
| |
| 基金项目： | 安徽农业大学校青年基金项目，国家自然基金项目 |
| |
| 摘 要： | 本研究旨在探明鸡恒定链跨膜区特定氨基酸在形成MHCⅡ-Ii复合物聚合中的作用特征.用大引物PCR定点突变法将鸡Ii链跨膜区2个氨基酸Gln47和Thr50分别突变为丙氨酸(Ala),再连接到pEGFP-C1载体中,构建含Ii-GFP融合基因的真核表达载体.同时还分别构建了含pDsRed2-N1-MHCⅡα、pDsRed2-N1-MHCⅡβ、pEG-FP-N1-MHCⅡa和pEGFP-N1-MHCⅡβ真核表达载体.用脂质体介导法将这些重组质粒单独或共转染至COS-7细胞,培养48 h后经荧光显微镜检测野生型Ii和突变型Ii与MHCⅡ类分子的细胞定位,并通过免疫共沉淀研究它们之间的相互关系.结果显示,野生型Ii链与MHCⅡα或MHCⅡβ之间存在细胞内的共定位,而突变型Ii与MHCⅡα或MHCⅡβ在细胞中共表达后未出现共定位现象.免疫共沉淀结果显示,在野生型Ii链与MHCⅡa或(和)MHCⅡβ单转染或三者共转染COS-7细胞后,均能检测到MHCⅡa-li、MHCⅡβ-Ii和MHCⅡ-Ii复合物,而突变型Ii链与MHCⅡα或(和)MHCⅡβ单转染或三者共转染COS-7细胞后,均检测不到MHCⅡα-Ii、MHCⅡβ-Ii和MHCⅡ-Ii复合物.因此Ii链跨膜区Gln47和Thr50 2个氨基酸对于MHCⅡ-Ii复合体的形成是至关重要的.
|
| 关 键 词： | 突变体 MHCⅡ类分子 恒定链 共定位 免疫沉淀 |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
