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干扰UCH-L3对牛骨骼肌卫星细胞增殖与分化的影响
作者姓名:胡蕾  朱菲菲  王轶敏  张林林  李新  郭益文  郭宏  丁向彬
作者单位:天津农学院动物科学与动物医学学院天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室
基金项目:天津市自然科学基金项目(18JCYBJC29700);国家自然科学基金项目(31772559);天津市“131”创新型人才培养工程第一层次人选资助项目;
摘    要:实验旨在探究泛素蛋白酶体中羧基末端水解酶L3(UCH-L3)对牛骨骼肌卫星细胞增殖和分化的影响。使用已经建立的牛骨骼肌卫星细胞体外成肌分化模型,体外模仿骨骼肌的发育过程,设计并合成UCH-L3的si-RNA,转染牛骨骼肌卫星细胞,筛选出有显著干扰效果的si-RNA。用EdU染色检测干扰UCH-L3对细胞增殖的影响。用免疫荧光的方法检测干扰UCH-L3表达后对肌管形成的影响,并采用Western blot技术检测分化后分化标志基因MyHC表达水平的变化,综合分析干扰UCH-L3对牛肌卫星细胞成肌分化的影响。结果表明:干扰UCH-L3后肌卫星细胞EdU染色阳性率与对照组无明显差异;干扰UCH-L3后分化形成肌管的数量少于对照组,肌管融合指数显著低于对照组,分化标志因子MyHC的蛋白水平显著低于对照组。本研究结果表明,干扰UCH-L3的表达能够抑制牛骨骼肌卫星细胞的成肌分化过程。

关 键 词:UCH-L3  牛骨骼肌卫星细胞  增殖  分化  
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