| 油菜茎基溃疡病菌LAMP-LFD检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 周圆,黄海龙,李孝军,单长林,李雪松,陈宇,邵炜冬,朱鹏.油菜茎基溃疡病菌LAMP-LFD检测方法的建立[J].植物检疫,2016(4):32-37. |
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| 作者姓名： | 周圆 黄海龙 李孝军 单长林 李雪松 陈宇 邵炜冬 朱鹏 |
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| 作者单位： | 1. 舟山出入境检验检疫局 浙江舟山316021;2. 宁波大学;3. 宁波大学;宁波博奥生物工程有限公司 |
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| 基金项目： | 浙江省科技厅公益项目(2013C32002);浙江省科技厅重大科技专项重点农业项目(2009C12054) |
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| 摘 要： | 本文基于环介导等温扩增技术与横向流动试纸条相结合的方法,建立了一种应用于油菜茎基溃疡病菌(Leptosphaeria maculans)的LAMP-LFD快速检测方法。以油菜茎基溃疡病菌的ITS基因序列为靶序列,设计出一套用于LAMP-LFD检测的引物和探针,优化了反应体系与反应条件(63℃,35 min)。结果表明:只有油菜茎基溃疡病菌出现阳性条带,其他参照菌株和阴性对照均未出现阳性条带,说明LAMP-LFD检测特异性强;灵敏度检测表明,对油菜茎基溃疡病菌的检测极限可低至114 fg/μL,灵敏度比传统PCR高10倍;该方法可从进境船载油菜籽样品中成功检测出油菜茎基溃疡病菌,检测结果与传统的鉴定方法一致。LAMP-LFD检测方法能够快速检测油菜茎基溃疡病菌,具有简便、灵敏、特异性高,不依赖特殊检测设备等优点,极具推广前景。
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| 关 键 词： | 油菜茎基溃疡病菌 LAMP-LFD检测方法 检测 |
Establishment of Leptosphaeria maculans detection by loop-mediated isothermal amplification combined with a lateral-flow dipstick |
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| Zhou Yuan;Huang Hailong;Li Xiaojun;Shan Changlin;Li Xuesong;Chen Yu;Shao Weidong;Zhu Peng.Establishment of Leptosphaeria maculans detection by loop-mediated isothermal amplification combined with a lateral-flow dipstick[J].Plant Quarantine,2016(4):32-37. |
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| Authors: | Zhou Yuan;Huang Hailong;Li Xiaojun;Shan Changlin;Li Xuesong;Chen Yu;Shao Weidong;Zhu Peng |
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| Institution: | Zhou Yuan;Huang Hailong;Li Xiaojun;Shan Changlin;Li Xuesong;Chen Yu;Shao Weidong;Zhu Peng;Zhoushan Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau;Ningbo University;Ningbo Boao Biological Engineering Co.,Ltd.; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Leptosphaeria maculans LAMP-LFD detection |
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