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抗氯霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选及金标试纸检测方法的建立
引用本文:王自良,王建华,杨艳艳. 抗氯霉素单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选及金标试纸检测方法的建立[J]. 西北农林科技大学学报(自然科学版), 2006, 34(5): 6-12
作者姓名:王自良  王建华  杨艳艳
作者单位:1. 西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100;河南科技学院,动物科学学院,河南,新乡,453003
2. 西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100
3. 河南省动物免疫学重点实验室,河南,郑州,450002
4. 河南科技学院,动物科学学院,河南,新乡,453003
摘    要:以BSA-CAP-HS免疫Balb/C小鼠,用细胞融合技术筛选抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞,体内诱生腹水法制备cAP mAb,并鉴定其免疫学特性;依据胶体金免疫层析试验(GICA)原理,以CAP mAb 为金标抗体,研制CAP残留快速检测金标试纸(CAP-Strip),并对其性能进行测定。结果表明,筛选出了3株杂交瘤细胞,其中最好的4F9-B2株间接ELISA效价细胞培养上清为1:1 280,腹水为1:640 000,亲和常数(Ku)为 1.84×1010 L/mol,对CAP的半数抑制浓度(IC50)为0.88μg/L,与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应(CR%)为150%,与其他酰胺醇类和抗菌素类药物无交叉反应;CAP-Strip的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit拟合曲线,目测检测限为0.5μg/L;其敏感性与竞争ELISA试剂盒相当,符合率为100%;可见CAP-Strip具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于CAP残留的快速检测,具有较高的推广应用价值。

关 键 词:氯霉素  细胞融合  单克隆抗体  胶体金免疫层析试验  快速检测试纸
文章编号:1671-9387(2006)05-0006-07
收稿时间:2006-02-16
修稿时间:2006-02-16

Filtration of hybridoma lines of monoclonal antibody and development of colloidal gold-labeled strip for rapid detection of chloramphenicol
WANG Zi-liang,WANG Jian-hua,YANG Yan-yan,YANG Ji-fei,ZHANG Hai-tang,FAN Guo-ying,ZHANG Gai-ping. Filtration of hybridoma lines of monoclonal antibody and development of colloidal gold-labeled strip for rapid detection of chloramphenicol[J]. Journal of Northwest A&F University(Natural Science Edition), 2006, 34(5): 6-12
Authors:WANG Zi-liang  WANG Jian-hua  YANG Yan-yan  YANG Ji-fei  ZHANG Hai-tang  FAN Guo-ying  ZHANG Gai-ping
Affiliation:(College of Animal Science and Technology,Northwest A & F University ,Yangling,Shaanxi 712100 ,China; College of Animal Science,Henan Institute of Science and Technology,Xinxiang,He’nan 453003,China; He’nan Provincial Key Laboratory for Animal Immunology,Zhengzhou,He’nan 450002,China)
Abstract:
Keywords:chloramphenicol    cell fusion    monoclonal antibody    gold immunochromatography assay   rapid test strip
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