黄麻DNA提取与RAPD反应体系的建立

以假黄麻、假长果、越南圆果 (圆果种黄麻 )等为材料 ,研究了黄麻 DNA的提取方法以及对 RAPD分析的影响因素 ,包括模板浓度、Mg2 + 、d NTP、引物和 Taq酶等 ,建立了适于黄麻种质 RAPD分析的 PCR反应体系 .即在 2 5μL反应体积中 ,Tris- HCl(p H8.0 )、KCl、Mg Cl2 、d NTP、随机引物的浓度分别为 10 mmol· L-1、5 0mmol·L-1、2 .5 mmol· L-1、15 0 μmol· L-1、0 .2 μmol· L-1,并含有 30 - 60 ng DNA与 1.5 U Taq DNA聚合酶 .扩增程序为 :94℃预变性 5 min;然后 94℃ 30 s,37℃ 1.5 min,72℃ 1min,4 1个循环 ;最后 72℃延伸 7mi

Studies on DNA extraction and establishment of RAPD reaction system in jute

Method of DNA extraction and factors influencing RAPD analysis,including the concentration of DNA template, Mg 2+ , dNTP, primers and Taq, in jute were studied. An optimal PCR system for RAPD analysis in jute was found: in 25 μL reaction solution, contained 10 mmol·L -1 Tris HCl(pH8.0),50 mmol·L -1 KCl,2.5 mmol·L -1 MgCl 2,150 μmol·L -1 dNTP, 0.2 μmol·L -1 random primer, 30-60 ng DNA template, 1.5 U Taq polymerase. The amplification program was devised:94 ℃ for 5 min; denaturing at 94 ℃ for 30 s, primer annealing at 37 ℃ for 1.5 min, extension at 72 ℃ for 1 min, 41 cycles; at last extension 72 ℃ for 7 min.