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绵羊肺炎支原体多表位融合基因MO-meAg1的构建、表达及重组蛋白免疫原性分析
引用本文:田路路,孟庆玲,乔 军,陈 诚,刘田莉,卢海亭,张星星,贡莎莎,才学鹏,陈创夫.绵羊肺炎支原体多表位融合基因MO-meAg1的构建、表达及重组蛋白免疫原性分析[J].西北农业学报,2017(5):678-684.
作者姓名:田路路  孟庆玲  乔 军  陈 诚  刘田莉  卢海亭  张星星  贡莎莎  才学鹏  陈创夫
作者单位:(1.石河子大学 动物科技学院,新疆石河子 832003; 2.中国农业科学院 兰州兽医研究所,兰州 730046)
基金项目:国家国际科技合作专项(2014DFR31310);国家自然科学基金(31360596,30960274)。
摘    要:为获得具有良好免疫原性的绵羊肺炎支原体(MO)重组蛋白,利用ABCpred等软件预测分析MO EF-P、PDHA、P97相似蛋白和EF-Ts蛋白的优势线性抗原表位,构建多表位融合基因MO-meAg1,合成后将其亚克隆至表达载体pET-32a(+),构建原核表达载体pET-32a(+)-MO-meAg1。将pET-32a(+)-MOmeAg1转化至感受态细胞E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达后检测重组蛋白反应原性和免疫原性。SDSPAGE结果显示,MO-meAg1重组蛋白分子质量约34.5ku;Western blot分析结果显示,该重组蛋白可被MO阳性血清特异性识别,具有良好的反应原性。小鼠免疫试验结果表明,重组蛋白MO-meAg1具有较强的免疫原性,诱导机体产生的抗血清其间接血凝效价可达1∶128以上。获得的多表位融合蛋白MO-meAg1为绵羊支原体肺炎的免疫学诊断及新型疫苗研究奠定基础。

关 键 词:绵羊肺炎支原体  抗原表位  多表位融合基因  表达

Construction,Expression and Reactionogenicity of Multi-epitope Fusion Gene of Mycoplasma ovipneumoniae
Abstract:
Keywords:Mycoplasma ovipneumoniae  Antigen epitopes  Multi-epitope fusion gene  Expression
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