绵羊肺炎支原体多表位融合基因MO-meAg1的构建、表达及重组蛋白免疫原性分析 |
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引用本文: | 田路路,孟庆玲,乔 军,陈 诚,刘田莉,卢海亭,张星星,贡莎莎,才学鹏,陈创夫.绵羊肺炎支原体多表位融合基因MO-meAg1的构建、表达及重组蛋白免疫原性分析[J].西北农业学报,2017(5):678-684. |
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作者姓名: | 田路路 孟庆玲 乔 军 陈 诚 刘田莉 卢海亭 张星星 贡莎莎 才学鹏 陈创夫 |
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作者单位: | (1.石河子大学 动物科技学院,新疆石河子 832003; 2.中国农业科学院 兰州兽医研究所,兰州 730046) |
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基金项目: | 国家国际科技合作专项(2014DFR31310);国家自然科学基金(31360596,30960274)。 |
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摘 要: | 为获得具有良好免疫原性的绵羊肺炎支原体(MO)重组蛋白,利用ABCpred等软件预测分析MO EF-P、PDHA、P97相似蛋白和EF-Ts蛋白的优势线性抗原表位,构建多表位融合基因MO-meAg1,合成后将其亚克隆至表达载体pET-32a(+),构建原核表达载体pET-32a(+)-MO-meAg1。将pET-32a(+)-MOmeAg1转化至感受态细胞E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达后检测重组蛋白反应原性和免疫原性。SDSPAGE结果显示,MO-meAg1重组蛋白分子质量约34.5ku;Western blot分析结果显示,该重组蛋白可被MO阳性血清特异性识别,具有良好的反应原性。小鼠免疫试验结果表明,重组蛋白MO-meAg1具有较强的免疫原性,诱导机体产生的抗血清其间接血凝效价可达1∶128以上。获得的多表位融合蛋白MO-meAg1为绵羊支原体肺炎的免疫学诊断及新型疫苗研究奠定基础。
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关 键 词: | 绵羊肺炎支原体 抗原表位 多表位融合基因 表达 |
Construction,Expression and Reactionogenicity of Multi-epitope Fusion Gene of Mycoplasma ovipneumoniae |
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Abstract: | |
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Keywords: | Mycoplasma ovipneumoniae Antigen epitopes Multi-epitope fusion gene Expression |
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