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基于液滴技术的烟草细胞免疫应激信号的检测
引用本文:苍小鑫,赵小明,钟润涛,王文霞,尹 恒,朱靖博,丁 燕.基于液滴技术的烟草细胞免疫应激信号的检测[J].西北农业学报,2017(5):759-767.
作者姓名:苍小鑫  赵小明  钟润涛  王文霞  尹 恒  朱靖博  丁 燕
作者单位:(1.中国科学院 大连化学物理研究所,辽宁大连 116023; 2.大连工业大学 食品学院,辽宁大连 116034;3.大连海事大学 环境科学与工程学院,辽宁大连 116026)
基金项目:国家自然科学基金(31370391);中国科学院科技服务网络计划(STS计划)(KFJ-SW-STS-143)。
摘    要:基于液滴微流控芯片技术,用壳寡糖(chitosan oligosaccharide,COS)处理悬浮培养的烟草细胞(BY-2cell),对烟草细胞产生的免疫应激信号分子(H_2O_2和Ca~(2+))进行荧光检测。用50μg/mL的壳寡糖水溶液分别刺激装载过氧化氢和钙离子荧光探针的烟草细胞,在荧光显微镜下观察到烟草细胞产生的荧光;以液滴微流控芯片为实验平台,研究发现水相流速为100μL/h,油相流速为300μL/h时,液滴尺寸为300μm,适合烟草细胞的包裹,在该条件下将COS与荧光探针孵育后的细胞包裹在液滴中,在荧光显微镜下观察到液滴中的荧光;后用荧光酶标仪检测96孔板和液滴承载的细胞的荧光强度,结果显示1h内两者的变化趋势一致。试验为液滴微流控芯片在植物免疫诱导剂和生物农药方面的研究提供了参考。

关 键 词:液滴微流控芯片  壳寡糖  烟草细胞  H2O2荧光探针  Ca2+荧光探针

Detection of Immunological Stress Signal for BY-2 Cell Based on Droplet Microfluidic
CANG Xiaoxin,ZHAO Xiaoming,ZHONG Runtao,WANG Wenxi,YIN Heng,ZHU Jingbo and DING Yan.Detection of Immunological Stress Signal for BY-2 Cell Based on Droplet Microfluidic[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2017(5):759-767.
Authors:CANG Xiaoxin  ZHAO Xiaoming  ZHONG Runtao  WANG Wenxi  YIN Heng  ZHU Jingbo and DING Yan
Abstract:
Keywords:Droplet microfluidic  Chitosan oligosaccharide  BY-2 cell  H2DCF-DA  Fluo-3AM
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