| 食品总铬质量浓度icELISA试剂盒的研制及初步应用 |
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| 引用本文： | 王亚楠,王晓斐,张雅凌,张海棠,王自良.食品总铬质量浓度icELISA试剂盒的研制及初步应用[J].西北农业学报,2017(12):1868-1876. |
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| 作者姓名： | 王亚楠 王晓斐 张雅凌 张海棠 王自良 |
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| 作者单位： | （1.河南科技学院 动物科技学院，河南新乡 453003; 2.动物病毒病防控与药残分析 河南省高校重点学科开放实验室，河南新乡 453003; 3.河南科技学院 新科学院，河南新乡 453003） |
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| 基金项目： | “十二五”国家科技支撑计划（2011BAK10B01-15,2014BAD13B05-01）。 |
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| 摘 要： | 为研制食品中总铬质量浓度检测间接竞争ELISA(icELISA)试剂盒(Cr-Kit)。利用蛋白质连接技术合成免疫原Cr~(3+)-iEDTA-BSA,紫外扫描(UV)和电感耦合等离子体原子发射光谱(ICP-AES)进行鉴定;用Cr~(3+)-iEDTA-BSA免疫BALB/c小鼠,细胞融合技术筛选抗Cr~(3+)-EDTA mAb细胞株,体内诱生腹水法制备Cr~(3+)-EDTA mAb,并对其特性进行分析;应用Cr~(3+)-EDTA mAb研制Cr-Kit,测定其性能并进行初步应用。结果表明,免疫原制备成功,Cr~(3+)-iEDTA-BSA中Cr~(3+)和BSA的质量浓度分别为140.8mg/L和5.81g/L;筛选出2A3C11、2A3D9、2A11G5共3株杂交瘤细胞株,其中2A11G5最好,经6次传代分泌抗体稳定,亲和常数(Ka)为2.69×109 L/mol,与其他重金属离子无交叉反应;Cr-Kit标准曲线的线性范围为1.0~264μg/L,检测限为1.0μg/L,IC50为8.37μg/L,河水样、大米样、面粉样和猪肉样的平均加标回收率分别为101.7%、96.47%、95.8%和84.3%,Cr-Kit与国标(GB5009.123-2014)石墨炉原子吸收光谱法(GFAAS)的符合率为100%。本研究成功研制了Cr-Kit,可满足食品总铬残留的检测要求。
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| 关 键 词： | Cr+ 免疫原 单克隆抗体 间接竞争ELISA试剂盒 总铬质量浓度 |
Establishment and Preliminary Application of an Indirect Competitive ELISA Kit for Detecting Total Chromium Mass Concentration in Food |
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| WANG Yanan,WANG Xiaofei,ZHANG Yaling,ZHANG Haitang and WANG Ziliang.Establishment and Preliminary Application of an Indirect Competitive ELISA Kit for Detecting Total Chromium Mass Concentration in Food[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2017(12):1868-1876. |
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| Authors: | WANG Yanan WANG Xiaofei ZHANG Yaling ZHANG Haitang and WANG Ziliang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Trivalent chromium ion Immunogen Monoclonal antibody Indirect competitive ELISA kit Total chromium mass concentration |
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