拟南芥转录因子IDD4不同突变体对灰葡萄孢菌的抗性分析

为明确IDD家族IDD4基因在拟南芥Arabidopsis thaliana抵抗灰葡萄孢菌Botrytis cinerea侵染过程中的作用，通过统计病情指数检测拟南芥野生型（wild type，WT）植株、过表达植株IDD4-OE和缺失突变体idd4植株感染灰葡萄孢菌情况，利用组织染色检测叶片细胞死亡和H₂O₂的积累情况，采用实时荧光定量PCR（real-time quantitative-PT-PCR，qRT-PCR）技术分析灰葡萄孢菌肌动蛋白基因Bc. ACTIN在3种植株叶片中的表达情况，并施加0.1 mmol/L外源水杨酸（salicylic acid，SA）后测定IDD4-OE植株的病情指数。结果显示，不同株系对灰葡萄孢菌的抗性由高到低依次为idd4＞WT＞IDD4-OE，IDD4-OE植株中病原菌感染部位的寄主细胞死亡程度比idd4植株严重。染色结果表明，病原菌侵染拟南芥后4 h，接种部位已有H₂O₂积累。qRT-PCR反应结果显示，Bc. ACTIN在IDD4-OE中比在idd4植株中的表达水平更高，表明灰葡萄孢菌在IDD4-OE植株中的繁殖速率更快。对IDD4-OE植株外源施加SA后，其病情指数、Bc. ACTIN表达量与WT植株间均无显著差异，说明SA能将感病植株的抗性提高至WT植株的水平，表明IDD4作为负调控因子参与了拟南芥对灰葡萄孢菌的抗性调控，SA在其中发挥着重要作用。