杧果SC-SSR分子标记反应体系的建立与优化 |
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作者单位: | 广西壮族自治区亚热带作物研究所, 广西南宁 530001 |
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基金项目: | 国家重点研发计划;广西农科院基本科研业务费专项;广西农科院基本科研业务费专项;广西农科院科技发展基金;中央高校基本科研业务费专项 |
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摘 要: | 采用正交设计方法,对影响PCR反应体系的5个因素(Mg2+、Taq DNA聚合酶、dNTPs、引物和模板DNA)进行了优化,建立了适用于杧果的SC-SSR-PCR反应体系。结果表明,总反应体系25μL中,包含模板DNA用量100 ng·mL-1、Mg2+浓度2.00 mmol·L-1、引物浓度0.40μmol·L-1、 Taq DNA聚合酶浓度1.00 U、 dNTPs浓度0.15 mmol·L-1。利用优化的杧果SC-SSR-PCR反应体系对10对SC-SSR引物进行验证,均能扩增出清晰、明亮、特异的电泳条带。因此,优化的杧果SC-SSR-PCR反应体系适用于杧果种质鉴定和亲缘关系分析。
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关 键 词: | 杧果SC-SSR 正交设计 体系优化 |
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