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中华蜜蜂泛素基因及其全长转录本的发掘及分析
作者姓名:刘小玉  张佳欣  高旭泽  冯佩林  蔡宗兵  那志豪  陈大福  郭睿  徐国钧
作者单位:福建农林大学蜂学与生物医药学院,福州 350002;福建农林大学蜂学与生物医药学院,福州 350002; 天然生物毒素国家地方联合工程实验室,福州 350002; 福建省蜂疗研究所,福建 350002
基金项目:国家自然科学基金项目(32172792, 31702190), 国家现代农业产业技术体系专项资金项目(CARS-44-KXJ7), 福建省自然科学基金面上项目(2022J01131334), 福建农林大学硕士生导师团队项目(郭睿), 福建农林大学科技创新专项基金项目(郭睿), 宁夏回族自治区重点研发项目(2022BBF02037)和福建农林大学动物科学学院(蜂学学院)科研扶持项目(郭睿)共同资助。
摘    要:旨在利用三代Nanopore测序技术发掘中华蜜蜂(Apis cerana cerana)泛素(ubiquitin)基因及其全长转录本。基于前期获得的中华蜜蜂工蜂4~6日龄幼虫肠道的全长转录组数据,使用BLAST工具将全长转录本的序列比对到KEGG和Nr数据库以鉴定泛素基因及其全长转录本。采用Astalavista软件分析泛素基因的可变剪接(alternative splicing,AS)事件,并通过RT-PCR加以验证。通过TAPIS pipeline软件分析泛素基因的可变多聚腺苷酸化(alternative polyadenylation,APA)位点。共鉴定到48个中华蜜蜂泛素基因和435条泛素基因相关全长转录本。共发掘到48个泛素基因的74次AS事件,包括31次内含子保留事件,19次可变3′端剪接事件,16次可变5′端剪接事件及8次外显子互斥事件。RT-PCR结果证实了3种AS事件类型的真实性。共预测到38个泛素基因含有1个及以上的APA位点,并且在APA位点的上游鉴定到多个motif,一致性序列为:KCWYTDYTMWSYGMW SCARAWCCAGAATGAYCCWYWGGHWVMWGWDRTRGC。研究结果丰富了中华蜜蜂泛素基因及其全长转录本信息,为持续深入开展相关功能研究提供参考和依据。

关 键 词:东方蜜蜂  中华蜜蜂  全长转录本  泛素  可变剪接  可变多聚腺苷酸化
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