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猪繁殖与呼吸综合征病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立与应用
引用本文:刘长龙,张建武,韦祖樟,袁世山.猪繁殖与呼吸综合征病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立与应用[J].中国预防兽医学报,2010,32(11).
作者姓名:刘长龙  张建武  韦祖樟  袁世山
摘    要:为快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),本研究针对PRRSV的N蛋白基因保守序列,设计特异性引物和TaqMan探针,以体外转录的RNA作为标准品,设计并优化了检测PRRSV的TaqMan荧光定量PCR方法。应用该方法检测其它主要猪病病原,结果均呈阴性;针对PRRSV阳性RNA的检测灵敏度可以达到10拷贝,比常规PCR灵敏10倍~100倍;结果表明,本实验建立的PRRSV TaqMan荧光定量PCR方法具有良好的特异性、敏感性和重复性。应用建立的方法测定攻毒猪血清中病毒的含量,免疫攻毒组和非免疫攻毒组在第7 d血清中病毒的载量差异不显著,而在第14 d差异显著,免疫攻毒组猪血清中病毒载量明显低于未免疫组。

关 键 词:猪繁殖与呼吸综合征病毒  荧光定量PCR  TaqMan探针  RNA标准品

Development and application of TaqMan one-step fluorescence quantitative RT-PCR assay for detection of porcine reproductive and respiratory syndrome virus
LIU Chang-long,ZHANG Jian-wu,WEI Zu-zhang,YUAN Shi-shan.Development and application of TaqMan one-step fluorescence quantitative RT-PCR assay for detection of porcine reproductive and respiratory syndrome virus[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2010,32(11).
Authors:LIU Chang-long  ZHANG Jian-wu  WEI Zu-zhang  YUAN Shi-shan
Abstract:
Keywords:
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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