| 鸡肝脏胆汁酸结合蛋白(L-BABP)抗血清制备及组织表达特性分析 |
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| 引用本文： | 张庆秋,石慧,丁宁,王宇祥,李辉,王启贵.鸡肝脏胆汁酸结合蛋白(L-BABP)抗血清制备及组织表达特性分析[J].农业生物技术学报,2011,19(3). |
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| 作者姓名： | 张庆秋 石慧 丁宁 王宇祥 李辉 王启贵 |
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| 作者单位： | 东北农业大学动物科学技术学院,哈尔滨,150030 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，黑龙江省普通高等学校青年学术骨干支持计划项目，博士后研究人员落户黑龙江科研启动金 |
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| 摘 要： | 制备鸡(Gallus gallus)肝脏胆汁酸结合蛋白(L-BABP)的多克隆抗血清,并分析L-BABP的组织表达特性.利用RT-PCR扩增L-BABP基因的CDS区,构建鸡L-BABP基因的GST融合蛋白表达质粒pGEX-4T/L-BABP.将重组表达质粒转化到大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中,经IPTG诱导后产生GST/L-BABP融合蛋白,利用Glutathione Sepharose 4B亲和层析纯化目的蛋白,将纯化的GST/L-BABP融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗血清.诱导得到了1个38 kD(12 kDL-BABP+26 kD GST)的融合蛋白,经间接ELISA方法测定制备的抗血清效价为1:100 000.利用此抗血清分析鸡L-BABP的组织表达特性,结果表明该基因仅在肝脏组织中特异性表达,在肾、肺、腿肌、腺胃、胸肌、心脏、脂肪、脾、回肠、肌胃、空肠和十二指肠等12种组织中没有检测到表达信号.本研究制备的高效价、高特异性的鸡L-BABP抗血清,为从蛋白水平上深入研究L-BABP的生物学功能提供了良好的基础.
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| 关 键 词： | 鸡 肝脏胆汁酸结合蛋白(L-BABP) 抗血清 表达特性 |
Antiserums Preparation and Tissue Expression Analyses of Chicken Liver Bile Acid Binding Protein(L-BABP) |
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| Zhang Qingqiu,Shi Hui,Ding Ning,Wang Yuxiang,Li Hui,Wang Qigui.Antiserums Preparation and Tissue Expression Analyses of Chicken Liver Bile Acid Binding Protein(L-BABP)[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2011,19(3). |
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| Authors: | Zhang Qingqiu Shi Hui Ding Ning Wang Yuxiang Li Hui Wang Qigui |
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