| 鹅细小病毒延边株VP3基因真核表达质粒构建 |
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| 引用本文： | 杜秋明,鲁承,王暖成.鹅细小病毒延边株VP3基因真核表达质粒构建[J].江苏农业科学,2010(3). |
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| 作者姓名： | 杜秋明 鲁承 王暖成 |
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| 作者单位： | 延边大学农学院动物医学系,吉林龙井,133400 |
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| 基金项目： | 吉林省牧业管理局项目 |
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| 摘 要： | 用碱裂解法对鹅细小病毒延边分离株进行GPV基因组DNA提取.根据已发表的鹅细小病毒VP3基因序列,设计1对含有EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ酶切位点的引物,以GPV基因组DNA为模板,应用PCR扩增出VP3基因片段,将VP3基因与克隆载体pMD 18-T连接,转化到感受态大肠杆菌BL21中进行克隆.用EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切该片段并回收该片段,将此基因片段克隆至相同酶切回收后的pVAXI真核表达载体中,获得重组质粒pVAXI-VP3,经PCR鉴定,限制性内切酶双酶切分析和克隆片段序列测定比较,证实了重组质粒的正确性.
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| 关 键 词： | 鹅细小病毒 VP3基因 真核表达 构建 |
Construction of eukaryotic expression plasmid for VP gene of GPV in Yanbian strain |
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