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非洲猪瘟病毒结构蛋白p54的原核表达与反应原性鉴定
引用本文:官丽娟,邵钰,任伟杰,宫枫举,韩同福,邹艳丽,孙学强,吴晓东,张志,黄保续.非洲猪瘟病毒结构蛋白p54的原核表达与反应原性鉴定[J].中国动物检疫,2019,36(12):63-87.
作者姓名:官丽娟  邵钰  任伟杰  宫枫举  韩同福  邹艳丽  孙学强  吴晓东  张志  黄保续
基金项目:国家重点研发计划项目(2017YFC1200503)
摘    要:p54蛋白为非洲猪瘟病毒(ASFV)的主要结构蛋白之一,参与病毒对靶细胞的吸附与进入。为深入研究p54结构蛋白的抗原性,根据GenBank序列号(MK128995)对应的E183L基因序列,设计1对特异性引物扩增其整个CDS区,并克隆至pET-30a(+)载体,构建了表达p54蛋白的重组质粒pET-30a(+)-p54。用BL21(DE3)转化该质粒,经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE电泳,可见重组质粒表达出1条分子量约为20 kDa的特异性条带,且重组表达蛋白以融合表达蛋白形式存在于上清。进一步通过His亲和层析法纯化目的蛋白,用ASFV阳性血清进行蛋白质免疫印迹反应,发现表达的重组p54蛋白能与ASFV阳性血清产生特异性反应,表明p54蛋白表达成功。本研究为ASFV抗体ELISA检测方法的建立奠定了基础。

关 键 词:非洲猪瘟病毒  结构蛋白  p54蛋白  表达

Prokaryotic Expression and Reactivity Identification of Structural Protein p54 of African Swine Fever Virus
Guan Lijuan,Shao Yu,Ren Weijie,Gong Fengju,Han Tongfu,Zou Yanli,Sun Xueqiang,Wu Xiaodong,Zhang Zhi,Huang Baoxu.Prokaryotic Expression and Reactivity Identification of Structural Protein p54 of African Swine Fever Virus[J].China Journal Of Animal Quarantine,2019,36(12):63-87.
Authors:Guan Lijuan  Shao Yu  Ren Weijie  Gong Fengju  Han Tongfu  Zou Yanli  Sun Xueqiang  Wu Xiaodong  Zhang Zhi  Huang Baoxu
Abstract:
Keywords:
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