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大孔树脂吸附-交联法固定脂肪酶
引用本文:钱明华,张继福,张云,孙爱君,于荣敏,朱建华,胡云峰.大孔树脂吸附-交联法固定脂肪酶[J].华南农业大学学报,2019,40(2):103-110.
作者姓名:钱明华  张继福  张云  孙爱君  于荣敏  朱建华  胡云峰
作者单位:暨南大学 中药生物技术研究所,广东 广州,510632;广东省中医院,广东 广州,510120;中国科学院 南海海洋研究所 中国科学院热带海洋生物资源与生态重点实验室/广东省海洋药物重点实验室,广东 广州,510301
基金项目:中国科学院战略性先导科技专项(XDA11030404);广东省海洋渔业科技攻关与研发方向项目(A201701C12);广州市科技计划项目(201510010012)
摘    要:【目的】为基于大孔树脂吸附结合环氧交联剂交联法固定脂肪酶等工业用酶奠定基础。【方法】使用大孔树脂吸附,而后环氧交联剂交联的方法进行脂肪酶的固定化,研究各因素对吸附–交联固定化的影响,并采用响应面法对固定化条件进行优化,制备固定化酶并考察其稳定性。【结果】筛选出大孔树脂HPD750为载体,聚乙二醇二缩水甘油醚为交联剂。最佳固定化条件为:吸附温度45℃,给酶量60 mg·g–1,交联温度30℃,交联时间12.5 h,pH6.36,交联剂体积分数为0.7%。由上述条件制备所得的固定化酶活力为565.31 U·g–1,酶活力回收率为32.16%。与游离酶相比,固定化酶的热稳定性和酸碱稳定性均有明显提升;连续操作10次,固定化酶活力仍保留34.86%,操作稳定性较好;4℃条件下储存30 d,固定化酶活力仍保留64.81%。【结论】大孔树脂HPD750为载体,聚乙二醇二缩水甘油醚为交联剂制备的固定化脂肪酶热稳定性、酸碱稳定性均得到显著提升,且具有良好的操作及储存稳定性。

关 键 词:脂肪酶  大孔树脂  环氧交联剂  聚乙二醇二缩水甘油醚  固定  响应面法
收稿时间:2018/4/16 0:00:00

Immobilization of lipase on macroporous resin by adsorption-crosslinking method
QIAN Minghu,ZHANG Jifu,ZHANG Yun,SUN Aijun,YU Rongmin,ZHU Jianhua and HU Yunfeng.Immobilization of lipase on macroporous resin by adsorption-crosslinking method[J].Journal of South China Agricultural University,2019,40(2):103-110.
Authors:QIAN Minghu  ZHANG Jifu  ZHANG Yun  SUN Aijun  YU Rongmin  ZHU Jianhua and HU Yunfeng
Institution:Biotechnological Institute of Chinese Materia Medica, Ji''nan University, Guangzhou 510632, China,Guangdong Provincial Hospital of Chinese Medicine, Guangzhou 510120, China,Chinese Academy of Sciences Key Laboratory of Tropical Marine Bio-resources and Ecology, South China Sea Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences/Guangdong Key Laboratory of Marine Materia Medica, Guangzhou 510301, China,Chinese Academy of Sciences Key Laboratory of Tropical Marine Bio-resources and Ecology, South China Sea Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences/Guangdong Key Laboratory of Marine Materia Medica, Guangzhou 510301, China,Biotechnological Institute of Chinese Materia Medica, Ji''nan University, Guangzhou 510632, China,Biotechnological Institute of Chinese Materia Medica, Ji''nan University, Guangzhou 510632, China and Chinese Academy of Sciences Key Laboratory of Tropical Marine Bio-resources and Ecology, South China Sea Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences/Guangdong Key Laboratory of Marine Materia Medica, Guangzhou 510301, China
Abstract:
Keywords:lipase  macroporous resin  epoxy crosslinker  poly (ethylene glycol) diglycidyl ether  immobilization  response surface design
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