多重RT-PCR同时检测6种马铃薯病毒及1种类病毒 |
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作者姓名: | 邹莹 杨立杰 谢锦 赵冀 毕恒翊 陈火云 宋波涛 马恢 聂碧华 |
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作者单位: | 1. 华中农业大学, 农业农村部马铃薯生物学与生物技术重点实验室, 武汉 430070; 2. 恩施土家族苗族自治州农业科学院, 湖北恩施中国南方马铃薯研究中心, 恩施 445000; 3. 河北省张家口市农业科学院, 张家口 075000 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(31971989);恩施州科技计划(D20210032);国家马铃薯产业技术体系(CARS-09-P07) |
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摘 要: | 病毒病是限制我国马铃薯生产的重要因子之一。本研究通过引物设计和体系优化建立了一套多重RT-PCR检测方法,可以在一个反应体系中同时检测6种马铃薯病毒和1种马铃薯类病毒以及1个马铃薯内参基因,包括马铃薯Y病毒(potato virus Y, PVY)、马铃薯M病毒(potato virus M, PVM)、马铃薯S病毒(potato virus S, PVS)、马铃薯X病毒(potato virus X, PVX)、马铃薯A病毒(potato virus A, PVA)、马铃薯卷叶病毒(potato leaf curl virus, PLRV)、马铃薯纺锤块茎类病毒(potato spindle tuber viroid, PSTVd)和细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ(cytochrome c oxidase subunitⅠ,CoxⅠ)基因的特异片段,产物大小依次为181、226、275、565、630、681、359、500 bp,符合理论预期。采用建立的方法以相应病毒和类病毒的质粒作模板进行检测,其检测灵敏度在1.6×10-3~1.8×10-1 ...
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关 键 词: | 马铃薯 病毒 类病毒 检测方法 多重RT-PCR |
收稿时间: | 2022-08-31 |
修稿时间: | 2022-10-31 |
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