| 牛分枝杆菌抗原MPB70、MPB83和ESAT-的融合表达及重组蛋白的初步应用 |
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| 引用本文： | 郭设平,刘思国,张秀华,王春来,宫强,郭洋,邵美丽.牛分枝杆菌抗原MPB70、MPB83和ESAT-的融合表达及重组蛋白的初步应用[J].畜牧兽医学报,2006,37(7):676-680. |
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| 作者姓名： | 郭设平 刘思国 张秀华 王春来 宫强 郭洋 邵美丽 |
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| 作者单位： | [1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨150001 [2]中国农业科学院研究生院,北京100081 [3]沈阳农业大学,沈阳110161 [4]东北农业大学,哈尔滨150030 |
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| 基金项目： | 国家科技攻关计划（2002 BA518A04） |
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| 摘 要： | 应用PCR方法从牛分枝杆菌Vallee株基因组中扩增获得mpb70、mpb83和esat-6三个目的基因片段。采用重叠延伸剪接技术（splicing by overlap extension，SOE）获得融合基因mpb70-mpb83后，将mpb70-mpb83和esat-6串连于同一表达载体pET32a（＋）中得到重组质粒pET70-83-E6。转化BL21（DE3）大肠杆菌感受态后，经IPTG诱导以可溶的形式表达融合蛋白。用Ni^2＋亲合层析的方法纯化该融合蛋白。Western blot分析显示：该融合蛋白能与抗牛分枝杆菌阳性血清发生特异性反应，而与牛副结核病阳性血清不反应。用该纯化蛋白初步建立了间接ELISA方法，并检测了117份临床血清样本（其中67份为PPD阳性牛血清），阳性率为39．32％（46／117）份，与PPD皮试诊断的符合率为82．05％（96／117）。
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| 关 键 词： | 牛分枝杆菌 融合表达 ELISA |
| 文章编号： | 0366-6964（2006）07-0676-05 |
| 收稿时间： | 2005-06-01 |
| 修稿时间： | 2005-06-01 |
Fusion Expression of MPB70, MPB83 and ESAT-6 of Mycobacterium Bovis and Its Use as Diagnostic Reagent |
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| GUO She-ping, LIU Si-guo , ZHANG Xiu-hua, WANG Chun-lai, GONG Qiang, GUO Yang, SHAO Mei-li.Fusion Expression of MPB70, MPB83 and ESAT-6 of Mycobacterium Bovis and Its Use as Diagnostic Reagent[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2006,37(7):676-680. |
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| Authors: | GUO She-ping LIU Si-guo ZHANG Xiu-hua WANG Chun-lai GONG Qiang GUO Yang SHAO Mei-li |
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| Institution: | 1. National Key Laboratory of Veterinary Biotechnology, Harbin Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Harbin 150001, China; 2. Graduate School, CAAS, Beijing 100081, China; 3. Shenyang Agricultural University, Shenyang 110161, China; 4. Northeast Agricultural University, Harbin 150001, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Mycobacterium boris fusion expression ELISA |
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