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| 利用Red重组系统敲除大肠杆菌rnc基因构建dsRNA原核表达体系 | |
| 引用本文： | 尹国华,刘楠,孙兆楠,宋云枝,朱常香,温孚江.利用Red重组系统敲除大肠杆菌rnc基因构建dsRNA原核表达体系[J].山东农业大学学报(自然科学版),2009,40(3). |
| 作者姓名： | 尹国华 刘楠 孙兆楠 宋云枝 朱常香 温孚江 |
| 作者单位： | 1. 山东农业大学植物保护学院,山东,泰安,271018 2. 山东农业大学生命科学学院,山东,泰安,271018 3. 山东农业大学作物生物学国家重点实验室,山东,泰安,271018 |
| 基金项目： | 山东省优秀中青年科学家科研奖励基金，泰安市大学生科技创新计划 |
| 摘 要： | 大肠杆菌的rnc基因编码产物为RNaseIII酶,RNaseIII酶能降解细菌中绝大多数dsRNA.利用来源于λ噬菌体的Red重组系统和重叠延伸PCR技术(gene splicing by overlap extension PCR,SOE-PCR),敲除了大肠杆菌origami(DE3)菌株的rnc基因,获得了RNaseIII 缺失型菌株M-origami.利用电激法,将构建的TMV运动蛋白基因(movement protein gene,MP)的dsRNA表达载体LMP480导入M-origami菌株中,IPTG诱导表达的结果显示:构建的M-origami/LMP480原核表达系统能高效表达TMV运动蛋白基因的dsRNA.初步的抗病性鉴定显示,表达的dsRNA能够诱发烟草对TMV的抗性. |
| 关 键 词： | Red重组系统 重叠延伸PCR RNaseIII 缺失菌株 病毒抗性 |
KNOCK-OUT THE RNC GENE OF E COLI USING RED-MEDIATED RECOMBINATION FOR CONSTRUCTION OF DSRNA PROKARYOTIC EXPRESSION SYSTEM |
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| YIN Guo-hua,LIU Nan,SUN Zhao-nan,SONG Yun-zhi,ZHU Chang-xiang,WEN Fu-jiang.KNOCK-OUT THE RNC GENE OF E COLI USING RED-MEDIATED RECOMBINATION FOR CONSTRUCTION OF DSRNA PROKARYOTIC EXPRESSION SYSTEM[J].Journal of Shandong Agricultural University,2009,40(3). | |
| Authors: | YIN Guo-hua LIU Nan SUN Zhao-nan SONG Yun-zhi ZHU Chang-xiang WEN Fu-jiang |
| Institution: | 1.College of Plant Protection;Shandong Agricultural University;Tai'an 271018;China;2.College of Life Sciences;3.College of Life Sciences;State Key Laboratory of Crop Biology;China |
| Abstract: | |
| Keywords: | dsRNA |
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