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谷子十里香抗锈抑制消减杂交文库构建及初步分析
引用本文:李志勇,贾丽霞,董立,王楠,白辉,全建章,刘磊,董志平.谷子十里香抗锈抑制消减杂交文库构建及初步分析[J].华北农学报,2014(6).
作者姓名:李志勇  贾丽霞  董立  王楠  白辉  全建章  刘磊  董志平
作者单位:1. 河北省农林科学院 谷子研究所,河北省杂粮重点实验室,国家谷子改良中心,河北 石家庄 050035
2. 河北工程大学,河北 邯郸,056021
基金项目:国家自然科学基金项目,河北省自然科学基金项目,“973”计划前期研究项目
摘    要:为了研究十里香抗锈分子机理及其调控机制。以谷子抗锈十里香接种12,24,48,72,96 h叶片为材料,利用抑制差减杂交技术,构建了谷锈菌诱导的SSH文库,筛选十里香接种与未接种锈菌差异表达的基因片段,通过Gen-Bank进行同源比对,对差异表达基因进行功能注释,并利用荧光定量PCR技术对部分差异表达片段进行表达分析。随机挑取差减文库中阳性克隆测序,共获得368个EST序列,插入片段大小为200~750 bp,通过网上GenBank非冗余数据库比对分析,发现其中32个EST与抗病相关。对与抗病相关的EST分析,推测WRKY转录因子、MAPK信号途径、钙信号途径、谷胱甘肽-S-转移酶、细胞色素P450、病程相关蛋白等可能参与了十里香与谷锈菌非亲和互作。进一步利用荧光定量PCR技术对SSH文库中4个基因做了表达分析,结果表明这些基因均受锈菌诱导表达。通过构建十里香受锈菌诱导的SSH文库,初步明确了十里香参与抗锈相关的基因,为下步谷子抗锈分子育种奠定基础。

关 键 词:抑制消减杂交  谷锈  谷子  表达序列标签

Construction and Preliminary Analysis of the SSH Library from the Foxtail Millet Rust Resistant Variety of Shilixiang
LI Zhi-yong,JIA Li-xia,DONG Li,WANG Nan,BAI Hui,QUAN Jian-zhang,LIU Lei,DONG Zhi-ping.Construction and Preliminary Analysis of the SSH Library from the Foxtail Millet Rust Resistant Variety of Shilixiang[J].Acta Agriculturae Boreali-Sinica,2014(6).
Authors:LI Zhi-yong  JIA Li-xia  DONG Li  WANG Nan  BAI Hui  QUAN Jian-zhang  LIU Lei  DONG Zhi-ping
Abstract:
Keywords:Suppression subtractive hybridization  Uromyces setariae  Foxtail millet  EST
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