| 海洋双RNA病毒(MABV) VP2和VP3基因在昆虫细胞中的高效表达 |
| |
| 引用本文： | 徐海君,杨章女,张传溪.海洋双RNA病毒(MABV) VP2和VP3基因在昆虫细胞中的高效表达[J].农业生物技术学报,2006,14(4):612-617. |
| |
| 作者姓名： | 徐海君 杨章女 张传溪 |
| |
| 作者单位： | 浙江大学应用昆虫研究所分子生物学实验室，杭州 |
| |
| 摘 要： | 海洋双RNA病毒(Marine birnavirus, MABV) 可引起多种海洋鱼贝的腹水病等病症。利用RT-PCR技术得到了MABV Y-6株系A片段的cDNA，进而克隆了病毒的外壳蛋白VP2e的抗原决定簇区642 bp片段(vp2e)和另一结构蛋白VP3编码区序列。通过转座作用构建了重组杆状病毒表达载体，在昆虫细胞中对VP2e 和VP3进行了表达。SDS-PAGE检测和薄层扫描表明，VP2e和VP3与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein, EGFP)融合蛋白表达量分别占整个昆虫细胞蛋白的15.8％和8.2％。用His Tag单抗和MABV病毒多抗对表达的VP2e融合蛋白进行Western blot检测，结果表明表达产物具有很好的抗原性。同样，用His Tag单抗和VP3多抗对表达的VP3融合蛋白进行的Western blot检测，证明融合蛋白表达正确，并且表达产物可溶，易于纯化。实验结果为该病毒结构蛋白和MABV疫苗研究提供了基础。关键词: 海洋双RNA病毒； VP2e; VP3; 杆状病毒表达系统; 表达纯化
|
| 收稿时间： | 2005-6-20 |
| 修稿时间： | 2006-3-30 |
|
| 点击此处可从《农业生物技术学报》浏览原始摘要信息 |
|
