| 猪IL-10 SYBR Green I Real-time PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 朱希旺,杜以军,李 俊,陈 智,于 江,张玉玉,夏焱春,周明明,王金宝,吴家强.猪IL-10 SYBR Green I Real-time PCR检测方法的建立[J].家畜生态学报,2014,35(8):13-17. |
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| 作者姓名： | 朱希旺 杜以军 李 俊 陈 智 于 江 张玉玉 夏焱春 周明明 王金宝 吴家强 |
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| 摘 要： | 白介素-10(IL-10)是一种具有免疫抑制作用的多能细胞因子。能够引发猪免疫抑制效应的多种病毒在感染宿主时均伴随有明显的IL-10上调,其中就包括猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),然而并不是所有的PRRSV毒株都能上调IL-10。为了详细探讨PRRSV免疫抑制与IL-10上调之间的关系以及PRRSV感染上调IL-10的具体分子机制,本研究针对猪IL-10以及看家基因β-actin的基因序列分别设计一对特异性引物,构建了各自含有IL-10、β-actin引物扩增序列的重组质粒为阳性标准品,建立了以2-△△Ct为基础的SYBR GreenⅠrealtime PCR检测方法。该方法线性关系良好;敏感性高,两种基因的检测下限均为1×101copies/μL;特异性强,扩增产物形成单一的特异性熔解峰;重复性良好,批内变异系数小于2%,批间变异系数小于3%;目的基因及内参基因的扩增效率较高,分别为92.7%、97.8%。综上所述,该方法可以用于猪IL-10mRNA水平的表达分析。
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Establishment of SYBR Green I based Realative Quantative
Real time PCR for Porcine IL 10 Detection |
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