3种动物源性膜芯片检测方法的构建

斑点杂交技术具有通量高、灵敏度高、检测时间短等优点，且操作方法简单、成本较低、对试验场所和设备要求不高，是适用于广大基层机构的检验技术。目前对于膜芯片的使用和推广还不是特别广泛。本文利用膜芯片技术构建一种肉及肉制品源性食品检测方法，分别设计猪、鸡、兔3种动物的肌细胞线粒体基因的特异性引物，并对3种动物基因组进行PCR扩增，用地高辛对扩增产物进行标记作为膜芯片的标记探针，对标记后的探针进行梯度稀释，选择最适浓度探针与6种动物特异性扩增产物进行斑点杂交试验。结果表明：标记探针在浓度为1pg/μL时仍然显点，与6种动物特异性扩增产物杂交结果显示，标记探针只与对应扩增产物发生显点，不与其他扩增产物反应。说明本研究设计的标记探针灵敏度高、特异性好，可用于猪、鸡、兔3种动物源性膜芯片检测。