| 猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP9蛋白单克隆抗体制备与鉴定 |
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| 引用本文： | 赵孟孟,张二芹,冯松林,郭依嘉,阮海宇,王文佳,邢星,张桂红.猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP9蛋白单克隆抗体制备与鉴定[J].东北农业大学学报,2016(7):63-69. |
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| 作者姓名： | 赵孟孟 张二芹 冯松林 郭依嘉 阮海宇 王文佳 邢星 张桂红 |
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| 作者单位： | 1. 华南农业大学兽医学院,国家生猪种业工程技术研究中心,广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室,广州510642;河南农业大学牧医工程学院,郑州450002;2. 河南农业大学牧医工程学院,郑州,450002;3. 华南农业大学兽医学院,国家生猪种业工程技术研究中心,广东省动物源性人兽共患病预防与控制重点实验室,广州510642;4. 河南牧业经济学院制药工程学院,郑州,450046;5. 广西钦州保税港区出入境检验检疫局,广西钦州,535008 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31272564)，公益性行业(农业)科研专项(201203039)，国家生猪现代农业产业技术体系项目(CARS-36) |
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| 摘 要： | 根据NSP9非结构蛋白参数选取相应30 bp DNA片段,片段串联后人工合成并连接p ET-28a(+)载体,大肠杆菌BL21中表达得到可溶蛋白,镍柱亲和层析纯化后免疫Balb/c小鼠,取免疫鼠脾细胞与SP2/0细胞骨髓瘤细胞融合。细胞融合后利用间接ELISA法杂交瘤细胞阳性克隆筛选,2次亚克隆后共获得3株抗PRRSV NSP9单克隆抗体,命名为3B17、3J13、3F19。这3株单抗可与大肠杆菌表达的蛋白产物和PRRSV感染的Marc-145细胞发生特异性反应。在PRRSV感染的Marc-145细胞中,NSP9蛋白表达水平接毒后不断升高,48 h达最高,为深入研究NSP9功能奠定基础。
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| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合征病毒 NSP9 单克隆抗体 杂交瘤 |
Preparation and identification of the monoclonal antibodies against NSP9 protein of porcine reproductive and respiratory syndrome virus |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | PRRSV NSP9 monoclonal antibodies hybridoma |
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