| 环介导恒温扩增技术快速检测对虾白斑综合征病毒方法的建立 |
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| 引用本文： | 李明云,丁文超,陈炯,史雨红. 环介导恒温扩增技术快速检测对虾白斑综合征病毒方法的建立[J]. 农业生物技术学报, 2011, 19(1). DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2011.01.027 |
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| 作者姓名： | 李明云 丁文超 陈炯 史雨红 |
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| 作者单位： | 宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室,宁波,315211 |
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| 基金项目： | 长江学者和创新团队发展计划(No.IRT0734); 国家科技支撑计划(No.2007BAD43B0); 浙江省科技厅重点项目(No.2008C22049)资助 |
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| 摘 要： | DNA环介导恒温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术是一种特异、灵敏、快速的新型基因检测技术,其检测结果可以通过琼脂糖凝胶电泳观察,也可以通过加入核酸染料SYBR GreenⅠ进行肉眼观察。本研究根据对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)的结构蛋白VP26基因序列,设计一套引物,成功建立了针对WSSV的LAMP检测方法。应用该方法,在65℃温育1h的条件下快速扩增病毒基因组DNA,琼脂糖凝胶电泳得到特异性梯度条带;在反应体系中添加SYBR GreenⅠ染料后,可通过肉眼观察有无荧光直接判定结果。该研究建立的LAMP法能特异性检出WSSV,其检测下限比PCR法低一个数量级,相当于0.563pg/μL的质粒(pMD19-T-VP26)浓度。表明所建立的WSSV LAMP检测法特异性好、灵敏度高、操作简单方便,有望作为WSSV快速诊断的常规方法。
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| 关 键 词： | 对虾白斑综合征病毒 VP26基因 环介导恒温基因扩增检测技术 |
Establishment of Loop-mediated Isothermal Amplification for Detection of White spot syndrome virus |
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| Li Mingyun,Ding Wenchao,Chen Jiong,Shi Yuhong. Establishment of Loop-mediated Isothermal Amplification for Detection of White spot syndrome virus[J]. Journal of Agricultural Biotechnology, 2011, 19(1). DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2011.01.027 |
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| Authors: | Li Mingyun Ding Wenchao Chen Jiong Shi Yuhong |
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| Affiliation: | Li Mingyun Ding Wenchao Chen Jiong Shi Yuhong Key Laboratory of Applied Marine Biotechnology,Ministry of Education,Ningbo University,Ningbo 315211,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | White spot syndrome virus(WSSV) VP26 gene Loop-mediated isothermal amplification(LAMP) |
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