| 猪肌内前体脂肪细胞的体外培养 |
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| 引用本文： | 张艳芳,任阳,朱琳娜,单体中,汪以真.猪肌内前体脂肪细胞的体外培养[J].农业生物技术学报,2011,19(1). |
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| 作者姓名： | 张艳芳 任阳 朱琳娜 单体中 汪以真 |
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| 作者单位： | 浙江大学饲料科学研究所,动物分子营养学教育部重点实验室,杭州,310029 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973)项目(No.2004CB117506)资助 |
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| 摘 要： | 本研究建立了猪肌内前体脂肪细胞的体外培养模型,以期为更深入研究猪肌内脂肪代谢提供新的实验方法。实验采集出生5d仔猪的背最长肌组织,Ⅱ型胶原酶消化2h后400目筛网过滤,然后1500r/min离心,沉淀用含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基(完全培养基)重悬后差速贴壁2h,弃去原有培养基,加入新的含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基(完全培养基)进行培养。细胞经传代且完全融合48h后,在完全培养基中添加0.5mmol/L3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX),1μmol/L地塞米松(DEX),10mg/L胰岛素(INS)进行诱导培养48h,再换以含10mg/L胰岛素的完全培养基培养48h,最后换完全培养基继续培养,直至90%的细胞出现脂滴。培养结果:细胞贴壁生长,呈短梭状或棱形,经诱导培养后细胞充脂率高。经形态学观察、生长曲线及油红O脂肪染色法鉴定,证明是肌内前体脂肪细胞。普通PCR及实时荧光定量PCR均检测到了脂联素基因的表达。本研究通过差速贴壁法成功培养了猪肌内前体脂肪细胞,并通过诱导培养重现了其分化、成熟的全过程。
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| 关 键 词： | 肌内前体脂肪细胞 细胞培养 猪 |
Culture of Porcine Intramuscular Preadipocyte In vitro |
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| Zhang Yanfang,Ren Yang,Zhu Linna,Shan Tizhong,Wang Yizhen.Culture of Porcine Intramuscular Preadipocyte In vitro[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2011,19(1). |
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| Authors: | Zhang Yanfang Ren Yang Zhu Linna Shan Tizhong Wang Yizhen |
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| Institution: | Zhang Yanfang Ren Yang Zhu Linna Shan Tizhong Wang Yizhen Institute of Feed Science,Zhejiang University,Key Laboratory of Molecular Animal Nutrition,Ministry of Education,Hangzhou 310029,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Intramuscular preadipocyte Cell culture Pig |
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