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南方根结线虫促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)基因的RNAi效应分析
引用本文:陈国华,肖罗,张双庆,杨宇红,谢丙炎. 南方根结线虫促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)基因的RNAi效应分析[J]. 植物病理学报, 2008, 38(5): 509-513
作者姓名:陈国华  肖罗  张双庆  杨宇红  谢丙炎
作者单位:1. 中国农业科学院蔬菜花卉研究所, 北京 100081;2. 湖南农业大学, 长沙 410007;3. 美国密西西比大学药学院, 密西西比 38677
基金项目:国家自然科学基金,国家高技术研究发展计划(863计划),国家重点基础研究发展计划(973计划),农业公益性行业科研专项经费项目 
摘    要: 促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)在线虫的生长发育等方面具有重要作用,本研究探索利用RNAi技术沉默南方根结线虫mapk-1基因来抑制线虫的生长发育。根据mapk-1基因的cDNA序列设计引物,通过体外转录合成约550bp的dsRNA对南方根结线虫的卵进行RNAi以沉默mapk-1基因。试验结果表明,将南方根结线虫的卵块浸泡在含有2mg/mL dsRNA的M9缓冲溶液中,24h后卵块孵化出的2龄幼虫数量明显多于对照组(无dsRNA),但孵化出的幼虫死亡率高达90%,而对照组的死亡率低于5%,说明mapk-1基因的沉默抑制了卵块的孵化和线虫的生长,同时将孵化的幼虫接种番茄,14d后番茄根部无根结产生,35d后无卵块产生;而浸泡72h后卵块孵化出的2龄幼虫几乎全部死亡,并且孵化的线虫数量明显少于对照。提取导入dsRNA的卵块的RNA进行半定量PCR分析,结果表明mapk-1基因的mRNA被降解。

关 键 词:南方根结线虫  卵块  促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)  RNAI  
收稿时间:2007-11-09

Analysis of silencing MAPK by RNA interference of root-knot nematode
CHEN Guo-hua,XIAO Luo,ZHANG Shuang-qing,YANG Yu-hong,XIE Bing-yan. Analysis of silencing MAPK by RNA interference of root-knot nematode[J]. Acta Phytopathologica Sinica, 2008, 38(5): 509-513
Authors:CHEN Guo-hua  XIAO Luo  ZHANG Shuang-qing  YANG Yu-hong  XIE Bing-yan
Affiliation:1. Institute of Vegetables and Flowers, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China;2. Hunan Agricultural University, Changsha 410007, China;3. Department of Pharmaceufics, School of Pharmacy, The University of Mississippi, MS 38677, USA
Abstract:
Keywords:RNAi
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