大豆酵母杂交cDNA文库的构建及GmSPX3互作蛋白的筛选 |
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引用本文: | 周汐,张璟曜,姚敏磊,谢凤斌,盖钧镒,杨守萍.大豆酵母杂交cDNA文库的构建及GmSPX3互作蛋白的筛选[J].大豆科学,2016(1):18-24. |
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作者姓名: | 周汐 张璟曜 姚敏磊 谢凤斌 盖钧镒 杨守萍 |
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作者单位: | 南京农业大学大豆研究所/国家大豆改良中心/农业部大豆生物学与遗传育种重点实验室/作物遗传与种质创新国家重点实验室,江苏南京,210095 |
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基金项目: | 国家转基因重大专项,国家高技术研究发展计划“863计划”,国家重点基础研究发展计划“973计划”,教育部长江学者和创新团队发展计划,江苏省现代作物生产协同创新中心 |
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摘 要: | 为研究Gm SPX3在大豆低磷胁迫响应中的作用机制,寻找与Gm SPX3发生相互作用的蛋白质,利用Gateway技术构建了低磷大豆根系酵母杂交c DNA文库,并使用p GBKT7-Gm SPX3融合蛋白为诱饵,采用酵母双杂交方法筛选酵母杂交c DNA文库,经过显色反应验证后获得21个阳性克隆,通过生物信息学分析,选择2个转录因子编码基因Gm UNE12和Gm Pos F21作为候选基因进行克隆,并分别构建AD载体p GADT7-Gm UNE12和p GADT7-Gm Pos F21,与诱饵p GBKT7-Gm SPX3进行一对一互作验证,结果证明Gm UNE12和Gm Pos F21蛋白均与Gm SPX3诱饵蛋白发生了相互作用。
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关 键 词: | 大豆 GmSPX3基因 Gateway技术 酵母杂交cDNA文库 酵母双杂交 |
Construction of Yeast Hybrid cDNA Library and Screening of Interaction Proteins of GmSPX3 in Soybean |
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Abstract: | |
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Keywords: | Soybean[Glycine max (L ) Merr ] GmSPX3 gene Gateway technology Yeast hybrid cDNA library Yeast two-hybrid |
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