| 菜豆几丁质酶基因Bchi的克隆及其在转基因烟草中的表达 |
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| 引用本文： | 王全伟,曲敏,张海玲,徐香玲.菜豆几丁质酶基因Bchi的克隆及其在转基因烟草中的表达[J].分子植物育种,2008,6(1):53-58. |
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| 作者姓名： | 王全伟 曲敏 张海玲 徐香玲 |
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| 作者单位： | 1. 哈尔滨师范大学生命与环境科学学院,哈尔滨,150080
2. 哈尔滨商业大学食品工程学院,哈尔滨,150076 |
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| 基金项目： | 黑龙江省科技厅科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 本文根据GenBank中公布的菜豆几丁质酶基因cDNA序列设计引物,通过RT-PCR得到一个菜豆几丁质酶基因家族基因Bchi.该基因编码一个327个氨基酸的多肽,其结构包括信号肽、几丁质结合区、铰链区、催化区和液泡定位多肽,属于Class Ia类内切几丁质酶.构建该基因的植物表达载体pMHL7133-Bchi,并通过发根农杆菌R1000介导转化烟草,经PCR和Southern blot鉴定获得了4株转基因烟草株系.几丁质酶活性分析表明,转基因烟草几丁质酶活力明显高于对照.抗真菌实验结果显示,转基因烟草的叶片基本无病斑产生,表明Bchi基因在烟草中高水平的表达显著提高了烟草对真菌病害的抗性.
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| 关 键 词： | 菜豆 几丁质酶 克隆和表达 烟草 菜豆 内切几丁质酶 酶基因 克隆 转基因 转化烟草 表达载体 Transgenic Tobacco Expression Chitinase Gene Bean 抗性 真菌病害 水平 片基 显示 结果 实验 抗真菌 酶活力 |
Cloning of Bean Chitinase Gene Bchi and its Expression in Transgenic Tobacco |
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| Wang Quanwei,Qu Min,Zhang Hailing,Xu Xiangling.Cloning of Bean Chitinase Gene Bchi and its Expression in Transgenic Tobacco[J].Molecular Plant Breeding,2008,6(1):53-58. |
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| Authors: | Wang Quanwei Qu Min Zhang Hailing Xu Xiangling |
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| Institution: | Wang Quanwei 1 Qu Min 2 Zhang Hailing 1 Xu Xiangling 1 1 Life Science , Environment Institute,Harbin Normal University,Harbin,150080,2 Food Engineering College,Harbin University of Commerce,150076 |
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| Abstract: | In this paper we obtained a Bchi gene from the local bean (Phaseolus vulgaris L.) based on the primers designed by the cDNA of bean chitinase gene published in GenBank by RT-PCR approach. The cDNA would belong to Class Ia endochitinase, a member of bean chitinase gene, encoding a polypeptide of 327 amino acid residues including signal peptide, chitin-binding domain, hinge domain, catalytic region and a polypeptide located in vacuole. We constructed the plant express construct, pMHL7 133-Bchi, and transforme... |
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