|
|||||
|
|
| 猪繁殖与呼吸综合征病毒GP_5基因重组腺病毒的构建及特性研究 | |
| 引用本文： | 马友记,赵兴绪,黄连清,李发弟,程小磊,LIU Ji-xing,柳纪省.猪繁殖与呼吸综合征病毒GP_5基因重组腺病毒的构建及特性研究[J].甘肃农业大学学报,2008,43(1):1-6. |
| 作者姓名： | 马友记 赵兴绪 黄连清 李发弟 程小磊 LIU Ji-xing 柳纪省 |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,甘肃,兰州,730046;甘肃农业大学动物科学技术学院,甘肃,兰州,730070 2. 甘肃农业大学动物科学技术学院,甘肃,兰州,730070 3. 中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,甘肃,兰州,730046 4. 中农威特生物科学技术股份有限公司,甘肃,兰州,730046 |
| 基金项目： | 重大基础研究“973”前期专项(2004CCA00500)，国家社会公益基金研究专项(2005DIB4J041) |
| 摘 要： | 将克隆到的猪繁殖与呼吸综合征病毒全长GP5基因插入到pAdTrack-CMV穿梭质粒中,再将重组质粒pAdTrack-CMV/GP5用PmeⅠ线性化后电转化携带有腺病毒骨架载体pAdeasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞,经细菌内同源重组产生重组腺病毒质粒pAdEasy-GP5,经酶切充分暴露反向末端重复序列,再与脂质体混合转染AD-293细胞,成功获得了AD-GP5复制缺陷型腺病毒,经检测证实AD-GP5稳定性好,安全性高.转录水平检测证实,GP5蛋白基因得到了转录;荧光检测发现,外源蛋白已得到表达. |
| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5 重组腺病毒 同源重组 |
| 文章编号： | 1003-4315（2008）01-0001-06 |
| 收稿时间： | 2007-08-28 |
| 修稿时间： | 2007年8月28日 |
Construction and characterization of recombinant adenovirus with porcine reproductive and respiratory syndrome virus GP5 |
|
| LIU Ji-xing.Construction and characterization of recombinant adenovirus with porcine reproductive and respiratory syndrome virus GP5[J].Journal of Gansu Agricultural University,2008,43(1):1-6. | |
| Authors: | LIU Ji-xing |
| Abstract: | Porcine reproductive and respiratory syndrome(PRRS) is one of the most important diseases that affect the swine industry nowadays.The GP5 gene of PRRS virus was cloned and then subcloned into adenovirus shuttle vectors pAdTrack-CMV,and the transfer vector pAdTrack-CMV/GP5 was constructed.After being linearized,the pAdTrack-CMV/GP5 was transformed into the E.coli strain BJ5183 cells and the recombinant supercoiled adenoviral vector pAdEasy-1 was constructed in the cells.After the inverted terminal repeat(ITR) sequence of pAdEay-1 was exposed fully by restriction enzyme digestion,the resultant recombinant was transfected into AD-293 with lipoplast.The current results showed that a stable and safety replication defective recombinant adenovirus AD-GP5 was produced successfully.The GP5 was transcribed and expressed,which was confirmed by a fluorescence microscope. |
| Keywords: | PRRSV GP5 recombinant adenovirus homologous recombination |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ | |