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羟基阿特拉津脱乙胺基水解酶(AtzB)典型酶学性质的研究
引用本文:张颖,梁海晶,马广鹏,姜昭,王志刚,南超,王溪,葛世杰.羟基阿特拉津脱乙胺基水解酶(AtzB)典型酶学性质的研究[J].东北农业大学学报,2013,44(5).
作者姓名:张颖  梁海晶  马广鹏  姜昭  王志刚  南超  王溪  葛世杰
作者单位:1. 东北农业大学资源与环境学院,哈尔滨,150030
2. 中国农村技术开发中心,北京,100045
3. 齐齐哈尔大学生命科学与农林学院,黑龙江齐齐哈尔,161006
基金项目:国家"十二五"科技计划项目
摘    要:采用Ni-NTA亲和层析法对基因重组菌中的羟基阿特拉津脱乙胺基水解酶(AtzB)进行分离纯化,并对该酶的典型酶学性质进行研究.纯化处理后,AtzB的纯度提高15倍,酶活回收率高达15.2%.酶学性质研究表明,AtzB的最适反应温度为40℃;最适反应pH为9.0.在最适反应条件下,AtzB对底物最大反应速率Vmax为3.17μmol·L-1·min-1,米氏常数Km为0.45 mmol·L-1.反应缓冲液中Cu(Ⅱ)对酶活力有相对较强的抑制作用(P<0.05),Zn(Ⅱ)对酶活力影响相对较小(P<0.05),而Co(Ⅱ)、Cr(Ⅲ)、Ca(Ⅱ)和Ni(Ⅱ)则对酶活力基本没有影响.盐度对AtzB活力影响较大,当缓冲液中NaCl浓度达到1 mol·L-1时,AtzB完全失活.

关 键 词:羟基阿特拉津脱乙胺基水解酶  羟基阿特拉津  蛋白纯化  酶学性质

Typical characterization of hydroxyatrazine N-ethylaminohydrolase (AtzB)
Abstract:
Keywords:hydroxyatrazine N-ethylaminohydrolase  hydroxyatrazine  protein purification  enzymatic properties
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